酵母菌对水华藻的竞争性抑制研究-环境工程专业论文.docxVIP

A Dissertation Submitted to Shanghai Jiao Tong University for Master’s Degree INVESTIGATION ON YEAST COMPETITIVE INHIBITION OF ALGAE BLOOM Author: Ye Qiuwen Specialty: Environmental Engineering Advisor: Prof. Cai Weimin School of Environmental Science and Engineering Shanghai Jiao Tong University Shanghai, P.R.China January, 2010 第 第 I 页 酵母菌对水华藻的竞争性抑制研究 摘 要 近年来，水体富营养化已成为我国乃至全世界的主要环境问题，然 而目前通常采用的物理、化学等治理方法效果并不理想。微生物法具有 廉价、安全、不破坏水体生态环境的特点，因此是未来富营养化防治的 发展方向，成为研究人员关注的焦点。 目前研究成果表明，有效微生物群(EM 菌)在河湖水富营养化治理方 面对水体透明度、叶绿素 a 含量显著的改善效果，在一定程度上可有效 抑制藻类的生长，防止水华的发生。若能确定 EM 菌中抑制藻类增殖的 主要微生物种类及其抑制机理，便可大大加速其扩培进程，增强其对土 著微生物的竞争优势，从而更有针对性的抑制水华藻的过度增殖。 基于上述思想，本研究采用选择性培养基从有效微生物群(EM)中富 集出酵母菌，通过向对数增长期的混合藻液中加入酵母菌、葡萄糖、酵 母菌+葡萄糖、经酵母菌发酵除菌后的溶液，分别考察其对水华藻的抑制 效应。并通过 HPLC-SEC 与三维荧光光谱(EEM)分析的方法，初步确定 抑藻活性物质的基本类别。 实验结果表明，经过 YPD 培养基富集分离的 EM 菌在营养物存在条 件下表现出了良好的抑藻活性。对比实验中，在没有生长基质存在的条 件下，混合酵母菌液并未对水华藻产生抑制作用；而在水华藻中投加经 过高温灭菌的酵母菌胞外物时却表现出了良好的抑藻活性，这表明混合 酵母菌的抑藻活性是由具有高热稳定性的胞外分泌物产生的。同时，通 第 第 II 页 过对受抑制营养藻细胞的显微镜观察发现，受抑制藻细胞的外部轮廓清 晰，结构完整，而颜色减淡，叶绿素质量浓度显著降低，推测该混合酵 母的抑藻活性物主要是通过破坏叶绿素而达到抑藻作用的。通过对受试 水样的 HPLC-SEC 与三维荧光光谱分析，初步确定该抑藻活性物质是含 有芳香环的酸性物质。 关键词：有效微生物群(EM)，酵母菌，胞外分泌物，水华藻，抑制 第 第 PAGE IV 页 INVESTIGATION ON YEAST COMPETITIVE INHIBITION OF ALGAE BLOOM ABSTRACT In recent years, eutrophication has become a major environmental problem of China as well as the world, but physical, chemical and other control method which is now commonly used is not quite effective. Microbiological method is characterized by cheapness, safety and undestroying with ecological environment of water, and therefore microbiological method, as a future direction of eutrophication prevention and controlling, is becoming the focus of researchers. In this study, selective media was used to enrich yeast from the Effective Micro-organisms (EM). By way of adding yeast, glucose, yeast + glucose and the zymolytic glucose solution into the mixed algae during the period of logarithmic growth phase, the inhibitory effect on the algae bloom were investigated. And basic