姜黄素对前列腺癌PC-3细胞影响的实验研究-外科学(泌尿外科)专业论文.docxVIP

博士学位论文 博士学位论文 中文摘要 中文摘要 研究背景：姜黄(Curcuma)是～种常用中药，它广泛应用于食品上 色和佐昧剂。从姜黄中提取的酚性色素——姜黄素(Curcurnin，Cur) 是姜黄的主要有效成分，姜黄素具有多方面的药理作用，如抗炎、 抗氧化、抗凝、降血脂、抗动脉粥样硬化及抗肿瘤等作用，尤其是 作为一种具有良好发展前景的抗癌药物，其抗肿瘤作用已日益引起 人们的重视，成为近年来研究的热点。姜黄素的抗癌机理是多方面 的，其中诱导肿瘤细胞凋亡的机制受到人们的广泛关注。有研究表 明，姜黄素能抑制多种体外培养的肿瘤细胞如皮肤癌、胃癌、十二 指肠癌、结肠癌、乳腺癌和膀胱癌细胞的生长及增殖，并诱导其细 胞凋亡，且可逆转或部分逆转这些肿瘤细胞的P糖蛋白 (P．glycoprotein，P-gp)介导的多药耐药。化疗在恶性肿瘤的治疗 中具有非常重要的作用，而耐药性是化疗失败的最常见和最难以克 服的问题之一。70年代中期，Joliano和Ling等人发现了肿瘤的多 药耐药(Multidrug resistance，MDR)现象，即对一种药物耐药的肿 瘤，同时对另外一些与之化学结构和作用机制完全不同的药物也有 交叉耐药现象。因此，揭示肿瘤产生多药耐药性的机理及其与临床 化疗之间的关系成为人们研究的热点。但姜黄素对前列腺癌细胞上 述方面作用的研究尚未见报道。虽然前列腺癌患者大部分通过治疗 能获得较好的疗效，但一段时间后，部分患者肿瘤复发，研究表明， 肿瘤复发与肿瘤细胞由对雄激素敏感的激素依赖性前列腺癌 (androgen dependent prostate cancer，ADPC)细胞转变为雄激素非依 赖性前列腺癌(androgen independent prostate cancer，AlPq细胞有 关。因此，如何治疗雄激素非依赖性前列腺癌，成为目前临床上亟 待解决的难题。前列腺癌PC．3细胞是一种雄激素非依赖性前列腺癌 细胞，有研究表明，雄激素非依赖性前列腺癌细胞较激素依赖性前 列腺癌高表达MDR．1基因。 本课题采用流式细胞术、MTT及透射电镜形态观察法，探讨姜 黄素对体外培养的人前列腺癌PC．3细胞凋亡及增殖的影响，并采用 免疫组化和RT-PCR的方法检测姜黄素对前列腺癌PC．3细胞多药耐 药MDR．1基因表达的调节作用。 博士学位论文 博士学位论文 中文摘要 第一部分 姜黄素诱导前列腺癌Pc一3细胞凋亡 及细胞增殖的实验研究 第一节 姜黄素诱导前列腺癌细胞株PC-3细胞凋亡 目的：观察和确定姜黄素对前列腺癌细胞是否具有凋亡诱导作 用。 方法：以前列腺癌细胞株PC．3细胞作为研究材料，用不同浓度 的姜黄素进行干预，利用细胞形态学、DNA电泳及流式细胞仪技术， 确定姜黄素对前列腺癌PC．3细胞凋亡的影响。 结果： ①姜黄素能引起前列腺癌PC．3细胞典型的凋亡形态学改变：即 细胞体积缩小，细胞核固缩、裂解、核碎片及凋亡小体形成。凋亡 细胞计数显示该作用呈时间及浓度依赖性。 @40“mol／L的姜黄素作用于前列腺癌PC．3细胞72小时，DNA 电泳可出现细胞凋亡时典型的梯状条带(Ladder)。 ③流式细胞仪测定：当分别以20Fmol／L和30Pmo]／L的姜黄素 作用于前列腺癌PC一3细胞72小时，出现典型的亚二倍体凋亡峰， 凋亡细胞百分率分别为7．6和51．47％。 结论：姜黄素能诱导前列腺癌PC一3细胞凋亡。 第二节：姜黄素抑制前列腺癌PC-3细胞增殖 目的：观察和确定姜黄素对前列腺癌PC．3细胞体外增殖的影 响，进一步阐明姜黄素抗前列腺癌的细胞机制。为I临床筛选新的前 列腺癌治疗药物提供实验依据。 方法：①液体培养条件下的细胞生长抑制试验； @MTT试验； ③cFU．PC一3琼脂半固体集落培养。 结果：①液体培养条件下，姜黄素对前列腺癌PC一3细胞的生长 博士学位论文 博士学位论文 中文摘要 具有明显的抑制作用，并呈明显的时效与量效关系。 ②MTr试验显示姜黄素对前列腺癌PC．3细胞具有直接 的细胞毒作用，并呈良好的量效关系(仁0．89)，IC50为32．72pmol／L。 ⑨10rtmol／L的姜黄素对前列腺癌PC．3细胞集落产率无 明显抑制作用(PO．05)，20-401．tmol／L的姜黄素对前列腺癌PC．3细胞 集落产率呈剂量依赖性抑制饵O．01)，IC50为33．59±2．811．tmol／L。 结论：姜黄素能明显抑制前列腺癌PC．3细胞的体外增殖。 1II 博士学位论文