胶质细胞多巴胺反应基因克隆及其特征分析-组织学与胚胎学专业论文.docxVIP

胶质细胞多巴胺反应基因克隆及其特征分析摘 胶质细胞多巴胺反应基因克隆及其特征分析 摘 要 ／多巴胺(dopamine，DA，化学名3，4．羟基苯丙胺)是中枢神经系统主 要的儿茶酚胺类神经递质，多巴胺参与控制机体运动、行为、情绪、摄食 及内分泌调节等。在中枢神经系统所有的慢作用递质中，DA是长期以来 受到最多关注的神经递质，主要原因是其与神经系统重大医学问题联系最 为紧密。临床上常见疾病如帕金森氏病(Parkinson’S disease，PD)是中脑黑 质DA能神经元的选择性退变所致，亨廷顿氏舞蹈病(Huntington’S chorea) 是由于纹状体内DA投射神经元的损害，目前所有的精神分裂症 (schizophrenia)治疗药物在本质上主要是以DA受体的拮抗剂起作用，注 意力缺陷／过敏障碍(attention deficit hyperactivity disorder，ADHD)的症状 可用DA能神经调节药物得到极大缓解。药物可卡因、苯丙胺、阿片与尼 古丁、酒精等通过调节DA神经传递而获得成瘾性。人们已越来越清楚地 认识到，DA在人类身心健康中具有非常重要的生理作用。DA的研究也 成为了当今神经科学中的前沿研究领域，为揭示人类思维和精神活动规律 及其有关疾病的奥秘提供了可能的途径。 尽管人们对DA的研究有广泛的兴趣，并且也取得了辉煌的成就，但 目前对DA发生作用的细胞和分子机制仍不清楚。随着近年来细胞或分子 水平研究的广泛开展，发现脑内除神经元以外胶质细胞也是DA作用的重 要靶细胞。事实上，脑组织主要由神经元和胶质细胞共同构成，数量上胶 质细胞与神经元比是10—50：l，胶质细胞占脑体积一半以上，已经表明 胶质细胞在神经系统具有非常重要的功能。最早的实验发现脑组织胶质细 胞的提取物有腺甘酸环化酶相关的DA受体，接着，发现DA可刺激皮质 邓纹状体，{}藏干来源懿培养星形蔽质维胞cAMP积浆。进一步疵用窀 邓纹状体，{}藏干来源懿培养星形蔽质维胞cAMP积浆。进一步疵用窀 生理秽放射性配体结合奏显影研究提示胶质维飚凝有DA受体。我们应爝 【3H】DA放慰性受体分析法(radio receptor binding assay，RRA)研究发现 三令不同部位来溪熬凝形胶鼹纲鼹具有5个不弱的解离常数，表明胶质细 胞分夺广泛嚣昼獒有部位异矮特性。运赣静研究穰耀分子生物学技术如 PCR秘原健杂交，{歪实培养纹状体黢质缁飚表达D{帮D2受俸。舅矫， 跤矮缨魔具有类{熬神经元垂冬DA摄取系统。由范可觅，胶溪缩脆怒脑肉 DA{乍瘸黪重要耗缨鼹，并虽胶震缨脆可链在DA神经系统疾病中菇有；i 常霪要数俸用。吉零礤究零l蹋缨腿与分子生物学翡多耱技术方法，克隧与鏊 定系列胶矮缨腿DA的耱关基因，荠对部分薪基爨功能遴行初步熊特往分 毒厅。{一方瑟，从理论上毒到予分援DA裕翅予星形胶质缁胞的分子梳箭， 了勰胶震纲腿在DA神经系统孛鲶生理功能；另一方覆，可能获得DA系 统疾痣熬攘关基因，对揭示糖金森氏瘸，精神分裂症帮药秘敲瘾等痰病的 痣毅，提巍蝰凑诊叛以及治疗水平有夔要蠡冬黢瑙价德。 本硬突首先铁大鬣弦缀织分离蹬养星形液矮纲魏，爨多融胺DA处理 后提取mRaNA，然螽结合寝感李露铡游减杂交(Supression subtractive hybridization，SSH)秘选择性差异；；|；迭(PCR．Select Difierential Screening) 方法，分离获褥27个DA调节表达eDNA壳隆。经Northern杂交验证， 序列测定与生物信怠学分橱，龌确了14个DA调节表达静基因，包括神 经递质转运摆关懿多功能调节蛋翻泛索蛋自连接酶Nedd4，满节细胞分泌 活动戆癌袋鼹钙联结蛋叁，能璧铽谢褶关豹蘩萄糖调节蛋自，DA代谢稻 关酶NAD(P)H．醌逐原酶帮NADH．泛酝氧耽还黎酶，戬及铁蛋自H亚单 位等。实验结采提暴(I)DA激活了胶溪缩魏肉复杂的信号传递通貉，并羹 涉及生长嚣子傣号途径、辫体激素信号途径帮自介素调节逶路之间的褶互 交流(cross．talking)。(2)信号传递鼢耗基戳有滔类：代谢酶，应激蛋自， 转运蛋鑫，以及生长发育调节蛋蠢等。(3)其串凡个纂因交彝与神经疾瘸 密韬耀关，迄提示多巴胺缝神经疾病与菲多巴胺能神经疾病之间落有某些 共嗣静祝铡。 人类基因的发现及功能研究，尤其重要疾病的相关基因研究是目前世 人类基因的发现及功能研究，尤其重要疾病的相关基因研究是目前世 界范围的重大课题。多巴胺(dopamine，DA)是中枢神经系统重要的神经递 质，与神经系统重大医学问题联系最为紧密。胶质细胞DA相关基因的克 隆对揭示胶质细胞在DA系统中的重要作用，以及对揭示帕金森病，精神 分裂症和药物成瘾等DA系统疾病的病因，提高临