结核杆菌环介导等温扩增检测方法及间接ELISA检测方法的分析-预防兽医学专业论文.docxVIP

主要符号表 英文缩写 中文名称 英文全文 bp ℃ 碱基对 摄氏度 Base pair Centigrade DNA 脱氧核糖核酸 Deoxyribonucleic acid ESAT-6 早期分泌 6KD 蛋白 early secretory antigentic target-6 ELISA 酶联免疫吸附试验 Enzyme linked immunosorbent assay iELISA 间接酶联免疫吸附试验 Inderect enzyme linked immunosorbent assay KD(a) 千道尔顿 Kilodalton LAMP 环介导等温扩增技术 Loop-Mediated Isothermal Amplification LJ 罗杰二氏培养基 Lowenstain-Jensen cultrue min 分钟 Minute mL 毫升 Millitliter MTB 结核分枝杆菌 Mycobacterium tuberculosis M.bovis M.avium 牛分枝杆菌 禽分枝杆菌 Mycobacterium bovis Mycobacterium avium OD 光密度 Opitical density OIE 国际兽医局 Office international des epizooties PBS 磷酸盐缓冲液 Phosophate –buffered saline PCR 聚合酶链式反应 Polymerase chain reaction pH pH 值 ph value TB 结核病 Tuberculosis μL 微升 Minute liter V 学位论文独创性声明 本人所呈交的学位论文是在我导师指导下进行的研究工作及取得的科研成果。据我 所知，除文中已经注明引用的内容外，本论文不包含其他个人已发表和撰写过的科研成 果。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体，均已在文中作了明确的说明并表示感谢。 研究生签名： 时间： 年 月 日 学位论文版权授权书 本人完全了解石河子大学有关保留、使用学位论文的规定，学校有权保留学位论文 并向国家主管部门和指定机构送交论文的电子版或纸质版。有权将学位论文用于赢利目 的的少量复制并允许论文进入学校图书馆被查阅。有权将学位论文的内容编入有关数据 库进行检索。有权将论文的标题和摘要汇编出版。保密的学位论文在解密后适用本规定。 研究生签名： 时间： 年 月 日 导师签名： 时间： 年 月 日 结核杆菌环介导等温扩增检测方法及间接 结核杆菌环介导等温扩增检测方法及间接 ELI SA 检测方法的研究 PAGE PAGE 10 第一章 文献综述 结核病的研究进展 结核病是由结核分枝杆菌杆菌引起的一种慢性人畜共患病，能够感染人和多种哺乳 动物以及禽类，其中导致人类感染的结核菌大多数是人结核分枝杆菌，也有 10%以上是 由牛分枝杆菌引起的。各个器官都可被侵犯，但以肺结核为多见。其病理特征是在多种 组织器官中形成肉芽肿和干酪样、钙化结节病变。 1.结核病的病原学 分枝杆菌属（Mycobacterium）是革兰氏阳性抗酸菌的代表。许多人和动物的病原菌。 有致病性的主要有结核分枝杆菌（M.Tuberculosis）、牛分枝杆菌（M.bovis）和禽分枝杆 菌（M.avium）。 结核分枝杆菌为细长、直或微弯的杆菌，单在、少数成丛，大小为 0.2-0.5μm× 1.5-4.0μm。牛分枝杆菌较短而粗，禽分枝杆菌呈多形性。结核杆菌菌体两端有浓染颗 粒，其余部分散在有小颗粒和小空泡，无鞭毛，无芽胞，无荚膜。由于菌型、菌株和菌 龄以及环境条件的不同，可见到球状、丝状、棒状或放线状等形态。 1.1 结核杆菌的生物学及培养特性 结核分枝杆菌对苯胺染料一般不易着色。应用抗酸染色如齐尼氏法，则结核杆菌呈 红色，其他非抗酸菌和细胞杂质等呈蓝色。结核杆菌因含大量类脂，抵抗力较强，尤其 对干燥抵抗力特强。含菌的干燥痰在阳光下可保持传染性达数周，在黑暗处可达一年以 上，在放牧的青草地上能存活 1.5 个月，在粪便、廐舍、土壤中能存活 6 个月以上。对 温热敏感，60℃半小时死亡。在寒冷条件可存活 4-5 年。对紫外线敏感，直射日光下 2-4 小时可杀灭大部分细菌。痰内结核杆菌用 5%石碳酸或 2%来苏尔经 12-24 小时才能杀死， 70%-75%乙醇数分钟即可杀死。乳中的结核杆菌 60℃经过 15-20 分钟被灭活。 本菌为专性需氧菌，对营养要求严格。最适 pH6.4-7.0，最适温度为 37-37.5℃，在 30-34℃可生长；低于 30℃或高于 42℃均不生长，但禽分枝杆菌可在 42℃生长。该菌生 长缓慢，在固体培养基上生长的菌落粗糙皱缩，类似花菜状；在液体培养基培养数周后