鱼铜蓝蛋白亚铁氧化酶CPELISA检测试剂盒.PDF

本试剂盒只能用于科学研究 ，不得用于医学诊断。 鱼铜蓝蛋白(亚铁氧化酶)(CP)ELISA 检测试剂盒 使用说明书 【鱼铜蓝蛋白(亚铁氧化酶)(CP)ELISA 检测试剂盒 试剂盒名称】 鱼铜蓝蛋白(亚铁氧化酶)(CP)ELISA 检测试剂盒 【鱼铜蓝蛋白(亚铁氧化酶)(CP)ELISA 检测试剂盒 试剂盒用途】 定量鱼血清、血浆及相关液体样本中铜蓝蛋白(亚铁氧化酶)(CP)的含量 【鱼铜蓝蛋白(亚铁氧化酶)(CP)ELISA 检测试剂盒检测原理】 本试剂盒采用双抗体两步夹心酶联免疫吸附法 （ELISA ）。将标准品、待测 样本加入到预先包被铜蓝蛋白(亚铁氧化酶)(CP)透明酶标包被板中 ，温育足够时 间后 ，洗涤除去未结合的成分 ，再加入酶标工作液 ，温育足够时间后 ，洗涤除去 未结合的成分。依次加入底物 A、B ，底物 （TMB ）在辣根过氧化物酶 （HRP ） 催化下转化为蓝色产物 ，在酸的作用下变成黄色 ，颜色的深浅与样品中铜蓝蛋白 (亚铁氧化酶)(CP)浓度呈正相关 ，450nm波长下测定 OD值 ，根据标准品和样 品的 OD值 ，计算样本中铜蓝蛋白(亚铁氧化酶)(CP)含量。 【鱼铜蓝蛋白(亚铁氧化酶)(CP)ELISA 检测试剂盒 试剂盒组成】 1 酶标包被板 12孔×8条 7 底物夜 A 6mL 2 标 准 品 ： 0.6mL 8 底物夜 B 6mL 200ng/ml 3 20 倍浓缩洗涤 20mL 9 终止液 6mL 液 4 标准品稀释液 6mL 10 说明书 1份 5 样本稀释液 6mL 11 封板膜 1张 6 酶标试剂 6mL 12 密封袋 1个 备注 ：标准品用标准品稀释液依次稀释为 ：200、100、50、25、12.5、6.25ng/ml 【鱼铜蓝蛋白(亚铁氧化酶)(CP)ELISA 检测试剂盒需要而未提供的试剂和器材】 1、37℃恒温箱 2、 标准规格酶标仪 3、 精密移液器及一次性吸头 4、 蒸馏水 5、 一次性试管 6、 吸水纸 【鱼铜蓝蛋白(亚铁氧化酶)(CP)ELISA 检测试剂盒操作步骤】 1、准备 ：从冰箱取出试剂盒 ，室温复温平衡 30分钟。 2、配液 ：用蒸馏水将 20倍浓缩洗涤液稀释成原倍的洗涤液。 3、加标准品和待测样本 ：取足够数量的酶标包被板 ，固定于框架上 ，分别设 置标准品孔、待测样本孔和空白对照孔 ，记录各孔位置 ，在标准品孔中加入标准 品 50μL ；待测样本孔中先加入待测样本 10μL ，再加样本稀释液 40μL （即样本 稀释 5倍 ）；空白对照孔不加。 4、温育 ：37℃水浴锅或恒温箱温育 30min。 5、洗板 ：弃去液体 ，吸水纸上拍干 ，每孔加满洗涤液 ，静置 1min ，甩去洗 涤液 ，吸水纸上拍干 ，如此重复洗板 4 次 （也可用洗板机按说明书操作洗板 ）。 6、加酶标工作液 ：每孔加入酶标工作液 50μL ，空白对照孔不加。 7、温育 ：重复 4 的操作。 8、洗板 ：重复 5的操作。 9、显色 ：每孔先加入显色剂 A 液 50μL ，再加入显色剂 B液 50μL ，37℃避 光显色 15min。 10、终止 ：取出酶标板 ，每孔加终止液 50μL ，终止反应 （颜色由蓝色立转黄 色 ）。 11、测定 ：以空白孔调零 ，在终止后 15分钟内 ，用 450nm波长测量各孔的 吸光值 （OD值 ）。 12、计算 ：根据标准品的浓度及对应的 OD值 ，计算出标准曲线的直线回归 方程 ，再根据样本的 OD值 ，在回归方程上计算出对应的样品浓度 ，也可以使用