重组大肠杆菌转化富马酸生产L丙氨酸-生物加工过程.PDF

第 １４卷第２期 生　 物　 加　 工　 过　 程 Ｖｏｌ１４ Ｎｏ２ ２０１６年３月 ＣｈｉｎｅｓｅＪｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｂｉｏｐｒｏｃｅｓｓ Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ Ｍａｒ２０１６ － ｄｏｉ：１０３９６９／ ｊｉｓｓｎ１６７２ ３６７８２０１６０２００２ 重组大肠杆菌转化富马酸生产 Ｌ 丙氨酸 １ ２ １ ２ １ １ １ １ 徐友强 ，马玉岳 ，姚　 粟 ，姜增妍 ，张　 奇 ，张　 露 ，裴疆森 ，程　 池 （１． 中国食品发酵工业研究院，北京 １０００１５； ２． 山东省富马酸生物转化工程技术研究中心，山东 烟台 ２６５７０９） 摘　 要：通过克隆来源于睾丸酮丛毛单胞菌的Ｌ 天冬氨酸 β 脱羧酶基因，在一株具有Ｌ 天冬氨酸酶生产能力 的大肠埃希氏菌ＣＩＣＣ １１０２２Ｓ 中异源表达，构建转化富马酸生产Ｌ 丙氨酸的重组工程菌。 结果发现：重组工程菌 ９ ｈ转化富马酸产生１１２７ ｇ／ Ｌ的Ｌ 丙氨酸，生产速率１２５ ｇ／ （Ｌ·ｈ），转化率９３８％。 富马酸价格较低，有效降低 Ｌ 丙氨酸生产的原料成本。 通过构建重组工程菌，以富马酸为底物，高效生产Ｌ 丙氨酸，结果表明该方法具有较 好的工业应用潜力。 关键词：Ｌ 丙氨酸；Ｌ 天冬氨酸酶；Ｌ 天冬氨酸 β 脱羧酶；重组工程菌 － － － 中图分类号：Ｑ７８　 　 　 　 文献标志码：Ａ　 　 　 　 文章编号：１６７２ ３６７８（２０１６）０２ ０００７ ０５ Ｔｒａｎｓｆｏｒｍａｔｉｏｎ ｏｆ ｆｕｍａｒｉｃ ａｃｉｄ ｆｏｒ ｔｈｅ ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ ｏｆ Ｌ⁃ａｌａｎｉｎｅ ｂｙ ｒｅｃｏｍｂｉｎａｎｔＥｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ ｃｏｌｉ １ ２ １ ２ ＸＵ Ｙｏｕｑｉａｎｇ ，ＭＡ Ｙｕｙｕｅ ，ＹＡＯ Ｓｕ ，ＪＩＡＮＧＺｅｎｇｙａｎ ， １ １ １ １ ＺＨＡＮＧ Ｑｉ ，ＺＨＡＮＧ Ｌｕ ，ＰＥＩＪｉａｎｇｓｅｎ ，ＣＨＥＮＧ Ｃｈｉ （１． Ｃｈｉｎａ Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ ｏｆ Ｆｏｏｄ ａｎｄ Ｆｅｒｍｅｎｔａｔｉｏｎ Ｉｎｄｕｓｔｒｉｅｓ，Ｂｅｉｊｉｎｇ １０００１５，Ｃｈｉｎａ； ２． Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ｃｅｎｔｅｒ ｏｆ Ｆｕｍａｒｉｃ Ａｃｉｄ Ｂｉｏｔｒａｎｓｆｏｒｍａｔｉｏｎ ｉｎ Ｓｈａｎｄｏｎｇ Ｐｒｏｖｉｎｃｅ，Ｙａｎｔａｉ ２６５７０９，Ｃｈｉｎａ） Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｔｈｅ ｇｅｎｅ ｃｏｄｉｎｇ ｆｏｒ Ｌ⁃ａｓｐａｒｔａｔｅ⁃β⁃ｄｅｃａｒｂｏｘｙｌａｓｅ ｆｒｏｍ Ｃｏｍａｍｏｎａｓ ｔｅｓｔｏｓｔｅｒｏｎｉ ｗａｓ ｃｌｏｎｅｄ ａｎｄ ｅｘｐｒｅｓｓｅｄ ｉｎ ａｎ Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ ｃｏｌｉ ｓｔｒａｉｎ ＣＩＣＣ １１０２２Ｓ ｗｉｔｈ ｔｈｅ ｃａｐａｂｉｌｉｔｙ ｆｏｒ Ｌ⁃ａｓｐａｒｔｉｃ ａｃｉｄ ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ． Ｔｈｅ ｒｅｃｏｍｂｉｎａｎｔ ｓｔ