僵蛹发酵方法改进的研究-中国医药生物技术.PDF

356 中国医药生物技术 2015 年 8 月第 10 卷第 4 期 Chin Med Biotechnol, August 2015, Vol. 10, No. 4 DOI:10.3969/cmba.j.issn.1673-713X.2015.04.017 ·论著· 僵蛹发酵方法改进的研究 刘学湘，卞莹莹，沙满义 【摘要】 炎，急、慢性支气管炎，荨麻疹，高脂血症[5] 。 目的 改进中药僵蛹的发酵方法，以提高其活性成分草酸铵 有关僵蛹的发酵制备方法早在 1971 年北京 的含量。 丝绸厂与中国科学院动物研究所就有研究报道，但 方法 以蚕蛹为发酵基质，通过接入白僵菌液体菌种制备形 是包括之后的研究中实验步骤均略显复杂[6] 。本实 成僵蛹。以草酸铵的含量为主要考察指标，结合基质转化率， 验运用固体发酵技术，选择白僵菌为发酵菌种，在 研究不同接种量对发酵工艺的影响，并与生药僵蚕中草酸铵 （27 ± 1 ）℃ 培养箱中对蚕蛹进行发酵，简化了操 的含量进行比较。 作过程，采用高效液相色谱法测定样品中草酸铵的 结果 与空白对照比较，随着白僵菌接种量的加大，僵蛹中 含量，考察接种量对发酵品中草酸铵含量的影响， 草酸铵的含量增加，其中以接种量为 20% 时含量达最大， 并与四个不同产地的生僵蚕药材中草酸铵含量进 为 7.72% ，在 5% ~ 25% 接种量范围内，僵蛹中草酸铵的 行比较。 含量均高于四个不同产地生僵蚕的含量。 1 材料与方法 结论 该固体发酵法简单、易行、可控，不易污染杂菌，能 1.1 材料 有效地提高活性成分草酸铵的含量，制备形成的僵蛹某种程 1.1.1 药品与试剂 生蚕蛹药材购自安徽丰原铜 度上可作为僵蚕的代用品。 陵中药饮片有限公司，分别产自四川（批号 【关键词】 僵蚕； 白僵菌属； 草酸铵； 固体发酵 140320）、浙江（批号 140320 ）、江苏（批号 140401 ） 中国医药生物技术, 2015, 10(4):356-360 和安徽（批号 140106 ），经陈建伟教授鉴定为蚕蛾 科动物家蚕蛾（Bombyx mori L. ）的蛹，临用前粉 僵蚕作为传统中药，应用广泛。它是自然感染 碎过 100 目筛；供试菌种白僵菌由南京中医药大 （或人工接种）白僵菌（Beauveria bassiana (Bals.) 学生物制药教研室分离、鉴定、传代并保藏；草酸 Vuillant ）而僵死的干燥全虫。目前为满足其临床需 铵、磷酸氢二铵、无水氯化钙、磷酸、葡萄糖、磷 要，人们多采用人工接种法生产僵蚕。但注射方法 酸二氢钾、七水合硫酸镁等均为国产分析纯。 人工接种白僵菌，不易感染成功，操作困难。由于 1.1.2 主要仪器 1260 型高效液相色谱仪为美 养蚕过程复杂、成本过高、影响蚕业生产等原因，