红曲霉和虎杖共发酵体系的初步研究-江苏农业科学.PDF

— ２７２— 江苏农业科学　２０１５年第４３卷第８期 谢炎福，杜苗苗．红曲霉和虎杖共发酵体系的初步研究［Ｊ］．江苏农业科学，２０１５，４３（８）：２７２－２７５． ｄｏｉ：１０．１５８８９／ｊ．ｉｓｓｎ．１００２－１３０２．２０１５．０８．０９０ 红曲霉和虎杖共发酵体系的初步研究 谢炎福，杜苗苗 （洛阳师范学院生命科学系，河南洛阳４７１０２２） 　　摘要：以红曲霉作为发酵菌种，中药虎杖作为发酵基质进行了双向发酵试验。结果表明，虎杖对于红曲霉的生长 和次级代谢产物ＭｏｎａｃｏｌｉｎＫ的积累具有促进作用，发酵后虎杖中白藜芦醇苷、结合大黄素含量降低，而白藜芦醇、大 黄素含量升高；经过发酵条件的优化，双向发酵的最佳工艺条件为：虎杖用量４％，发酵温度２８℃，接种量９％，发酵 ６ｄ，发酵后虎杖中白藜芦醇含量达１．２９％，大黄素含量０．６７％，ＭｏｎａｃｏｌｉｎＫ含量０．４８ｍｇ／Ｌ，综合得分为０．７７５。与 未发酵组相比，白藜芦醇含量提高了３～４倍，大黄素含量提高了约１倍。 　　关键词：红曲霉；虎杖；双向发酵；白藜芦醇；ＭｏｎａｃｏｌｉｎＫ 　　中图分类号：Ｒ２８２．７１；Ｒ２８５．５　　文献标志码：Ａ　　文章编号：１００２－１３０２（２０１５）０８－０２７２－０４ 　　虎杖是我国的一种传统中药，其主要活性成分为以白藜 藜芦醇和游离大黄素的潜力［９］。因此，将红曲霉与虎杖一起 芦醇为代表的芪类化合物和大黄素为代表的蒽醌类化合物， 共同构建双向发酵体系产生的药性菌质比两者分别入药更能 白藜芦醇具有降压降脂、预防心脑血管疾病、抗癌、增强免疫 得到优势互补的功效。本次研究在前期中药筛选和红曲霉菌 ［１］ 力、延年益寿等多重功效 ，在花生、葡萄等７０多种植物中广 株定向诱变的基础上，利用虎杖作为红曲霉发酵的药性基质， 泛存在，但以虎杖中含量较高，一般在０．２％左右，而其糖苷 旨在探讨通过红曲霉发酵虎杖达到提高白藜芦醇、大黄素含 ［２］ 虎杖苷含量则高达２％ ，白藜芦醇的生物活性是虎杖苷的 量和红曲霉中ＭｏｎａｃｏｌｉｎＫ等有效活性成分含量的目的，并进 ［３］ ［４］ 数十倍 。目前，白藜芦醇主要采用有机溶剂萃取 ，有机 行发酵条件的初步优化，为红曲霉药性基质双向发酵的研究 溶剂毒性大，在提取物中均有或多或少的残留，若作为药物和 打下基础。 保健品来使用，无论从健康角度或消费者心理方面均不太容 １　材料与方法 易接受，且植物药材大部分有效成分包含在植物细胞壁中，一 般的有机溶剂不易破坏，提取效率低，所以采用绿色安全的提 １．１　试验材料 取方法并将虎杖苷转化为更具活性的白藜芦醇成为现在的研 １．１．１　红曲霉（Ｍｏｎａｓｃｕｓ）：为本实验室保存菌种，经过紫外、 ［５］ 究热点之一。采用酶解法环境友好 ，常温常压下即可完 化学诱变获得（见图１）。 成，但酶的价格高昂。彭源德等、龚云杰等分别利用黑曲霉、 １．１．２　虎杖（ＰｏｌｙｇｏｎｕｍｃｕｓｐｉｄａｔｕｍＳｉｅｂ．ｅｔＺｕｃｃ．）：购自洛 酵母菌对虎杖进行发酵，达到和超过了酶解法的效果［６－７］，显 阳医药城，于６０℃干燥箱中烘干至恒质量，用实验室小型粉 示出生物发酵法在虎杖活性成分转化方面的巨大潜力，但他 碎机粉碎过１２０目筛备用。 们仅研究了真菌对虎杖的单向作用，菌种本身没有生物活性 １．１．３　发酵培养基：参照文献［１０］的配方进行适当的改动， 成分产生，并且部分菌种不是生物安全菌种。所以，如果能够 葡萄糖１０ｇ，虎杖粉３０ｇ，硝酸钠３ｇ，酵母提取物１ｇ，磷酸氢 采用具有生物安全性，且在对虎杖进行发酵的同时产生类似