时间分辨荧光免疫分析解析方法的光谱研究探究资料.pdfVIP

第 2 4 卷 , 第5 期 　 　　　　　　　　　　　光 谱 学 与 光 谱 分 析 Vol24 ,No 5 ,pp596599 2 0 0 4 年 5 月 　　　　　　　　　　　 　Spectroscopy and Spectral Analysis May , 2004 　 时间分辨荧光免疫分析方法的光谱研究 郭周义 , 田　振 , 贾雅丽 华南师范大学激光生命科学研究所 , 广东 广州 　510631 摘 　要 　时间分辨荧光免疫分析法是用三价稀土离子及其螯合剂作为示踪物 , 标记蛋白质 、激素 、抗体 、核 ( 酸探针或生物活性细胞 , 待反应体系 如 : 抗原抗体免疫反应 、生物素亲合反应 、核酸探针杂交反应 、靶细胞 ) 与效应细胞的杀伤反应等 发生后 , 用时间分辨荧光技术测定反应体系中分析物的浓度 , 达到定量分析的目 的。它之所以能够继放射性同位素标记 、酶标记 、化学发光 、电化学发光后成为一种更新 、更灵敏的检测方 法 , 主要取决于它所用标记物三价稀土离子螯合物独一无二的物理及化学性质 。主要报导了对使用的长寿 命荧光团 Eu3 + 螯合物的光谱研究结果 , 时间分辨技术及荧光增强技术的原理 。实验表明: 选择 336～337 nm 的激发波长 , 有利于 Eu3 + 的配位二酮体的激发及能量转移 。 主题词 　免疫分析 ; 荧光增强技术 ; 时间分辨光谱技术 ; Eu3 + 螯合物 中图分类号 :O65732 　　文献标识码 :A 　　　文章编号 :(2004) 11 　f —f 跃迁光谱 引　言 指 f n 组态内, 不同J 能级间跃迁所产生的光谱 。它的特 点是 : ( ( ) 　　最近几年发展起来的时间分辨荧光免疫分析方法 TR 1 发光弱 。这主要是因为 f —f 跃迁是宇称选择规则禁 FIA) 是超微量免疫检定法的一大突破 。由于使用了时间分辨 阻的。虽然在溶液和固态化合物中, 由于配体场微扰, 也能 光谱技术和荧光增强技术 , 使荧光免疫分析的灵敏度得到了 观察到相应的光谱, 但相对于 d —d 跃迁来说, 也是相当弱 极大提高 。1983 年 Petterson[ 1 ] 和 Eskola[ 2 ] 首先将时间分辨荧 的。 ( ) 光光谱技术应用于免疫分析的研究中。目前 , TRFIA 的最低 2 类线性的光谱 。谱带的尖锐原因是处于内层的4f 电 检出值已达 10 - 19 mol ·well - 1 , 远远超过酶标记免疫分析法 子受到 5s2 , 5 p 6 电子的屏蔽 , 受环境的影响较