红景天对拟血管性痴呆大鼠海马SOD、MDA、AchE及凋亡细胞影响的实验研究.pdfVIP

山西医科大学硕士学位论文 第一章材料与方法 1．1实验动物 清洁级健康三月龄雄性Wister大鼠，山西省中医药研究院实验动物中心提供，体重 净饮水。 1．2实验药物、试剂和设备 1．2．1实验药物 红景天，生药购自山西千鹤药业有限公司，由山西省中医药研究院制剂室制备为干燥 加水2500ml，煎煮1小时；第3次加水2000 ml，煎煮1小时，过滤，合并3次提取液， 浓缩到稠膏干燥，称重，粉碎，4。C冰箱保存，用时用蒸馏水溶解。 尼莫地平，天津市中央药业有限公司产品。商品名为尼达尔。生产批号050801，规格 20mg／片，用时研碎，以蒸馏水溶开。 麻醉剂为戊巴比妥钠粉剂，中国医药(集团)上海化学试剂公司，批号F971104。 1．2．2实验试剂 实验试剂盒由南京建成生物工程研究所提供。 试剂盒批号：考马斯亮 SOD ⅣD Ach 1．2．3实验仪器设备仪器 MT200 Morris水迷宫视频跟踪分析系统 成都泰盟公司 EACSCalibur流式细胞仪 美国BD公司 50紫外可见分光光度计 美国瓦里安公司 Cary 3K30台式高速冷冻离心机 德国SIGMA公司 低速离心机 北京医用公司 超纯水系统 英国ELGA公司 Sartorius电子天平 德国Sartorius公司 各种规格的移液器 德国Eppendorf公司 RF540型电热恒温水浴箱 江苏金坛市医疗仪器厂 XW-80A漩涡混合器 上海医科大学仪器厂 匀浆机 德国Ⅱ弧公司 3 制冰机 美国格兰特公司 D、柑OL26低温冰柜 青岛海尔公司 1．3实验方法 1．3．1动物模型制备 commoncarotid 参照刘汇波【11l造模方法，采用双侧颈总动脉结扎法(Bilateral artery 后，仰卧固定在手术台上，采用60瓦的灯泡直接照射，保持动物肛温在37C左右，以防 止低温对脑缺血损伤的保护作用。保持空气流通，常规备皮消毒，颈正中切口，钝性分离 皮下组织，然后再钝性分离胸骨舌骨肌和胸骨乳突肌后便可以见到颈总动脉(common carotid 双侧CCA，缝合伤口。假手术组在分离CCA后即可缝合伤口。所有大鼠缝合伤口前均在 伤口处撒敷青霉素粉末，每只20万u青霉素。放回笼中保温饲养。术后三天内肌注青霉素 以预防感染。造模后动物在同等条件下(室温24℃左右，相对湿度50士5％)，普通饲养，自 由饮水。 1．3．2实验设计 1．3．2．1实验分组 把所有64只大鼠称重，’排序，采用随机数字表法分为8组。取其中任意一组8只大 鼠作为假手术组施行假手术，只分离CCA而不结扎。另外56只大鼠进入造模组，施行双 侧CCA结扎。 1．3．2．2VD模型制备情况 8只施行假手术的大鼠无死亡。造模组的56只大鼠死亡27只，均