课件：酶的特性实验.ppt

实验十：酶的特性 实验目的：加深对酶的性质的认识。 实验内容： 温度对酶活力的影响 pH对酶活力的影响 酶的激活及抑制剂 酶的专一性 温度对酶活力的影响 一、原理： 酶的催化作用受温度的影响，在最适温度下，酶的反应速度最高。大多数动物酶的最适温度为37－40℃，植物酶的最适温度为50－60℃ 。 酶对温度的稳定性与其存在形式有关。有些酶的干燥制剂，虽加热到100℃，其活性并无明显改变，但在100℃的溶液中却很快地完全失去活性。 低温能降低或抑制酶的活性，但不能使酶失活。 二、器材： 试管及试管架 恒温水浴 冰浴 沸水浴 三、试剂和材料： 含0.2﹪淀粉的0.3％NaCl溶液150ml，需新鲜配制 稀释200倍的唾液50ml：用蒸馏水漱口，以清除事物残渣，再含一口蒸馏水，半分钟后使其流入量筒并稀释200倍，混匀备用。 KI－碘溶液50ml：将KI20g及碘10g溶于100ml水中。使用前稀释10倍。 四、操作方法： 淀粉和可溶性淀粉遇碘呈蓝色。糊精按其分子的大小，遇碘可呈蓝色、紫色、暗褐色或红色。最简单的糊精遇碘不呈颜色，麦芽糖遇碘也不呈色。在不同温度下，淀粉被唾液淀粉酶水解的程度，可由水解混合物遇碘呈现的颜色来判断。 取三支试管，编号后按下表加入试剂： 管号 1 2 3 淀粉溶液（ml） 1.5 1.5 1.5 稀释唾液（ml） 1 1 － 煮沸过的稀释唾液（ml） － － － 摇匀后，将1号、3号两试管放入37 ℃ 恒温水浴中，2号试管放入冰中，10min后去处，（将2号管内液体分为两半）用KI－碘溶液来检验1、2、3管内淀粉被唾液淀粉酶水解的程度。记录并解释结果，将2号管剩下的一半溶液放入37℃水浴中继续保温10min后，再用碘液实验，结果如何？ pH对酶活性的影响 一、原理 酶的活力受环境pH的影响极为显著。不同酶的最适pH值不同。本实验观察pH对唾液淀粉酶活性的影响，唾液淀粉酶的最适pH约为6.8。 二、器材 试管及试管架 吸管 滴管 50ml锥形瓶 恒温水浴 三、试剂和材料 新配制的溶于0.3％NaCl的0.5％淀粉溶液 250ml 稀释200倍的新鲜唾液 100ml 0.2mol/L磷酸氢二钠溶液 600ml 0.1mol/L柠檬酸溶液 400ml KI－碘溶液 50ml pH试纸： pH=5、 pH=5.8、 pH=6.8、 pH=8四种 四、操作方法： 取四个标有号码的50ml锥形瓶。用吸管按下表添加0.2mol/L磷酸氢二钠溶液和0.1柠檬酸溶液以制备pH5.0－8.0的四种缓冲液。 从四个锥形瓶中各取缓冲液3ml，分别注入4支带有号码的试管中，随后于每个试管中添加0.5％淀粉溶液2ml和稀释200倍的唾液2ml。向各试管中加入稀释唾液的时间间隔各为1min。将各试管内容物混匀，并依次置于37 ℃恒温水浴中保温。 第四管加入唾液2min后，每隔1min由第3管取出一滴混和液，置于白瓷板上，加1小滴KI－碘溶液，检验淀粉的水解程度。待混和液变为棕黄色时，向所有试管依次添加1－2滴KI－碘溶液。添加KI－碘溶液的时间间隔从第一管起，亦均为1min。 观察各试管内容物呈现的颜色，分析pH对唾液淀粉酶活性的影响。 锥形瓶 号码 0.2mol/L磷酸氢二钠（ml） 0.1 mol/L柠檬酸（ml） pH 1 5.15 4.85 5.0 2 6.05 3.95 5.8 3 7.72 2.28 6.8 4 9.72 0.28 8.0 唾液淀粉酶的活化和抑制 一、原理 酶的活性受活化剂或抑制剂的影响。氯离子为唾液淀粉酶的活化剂，铜离子为其抑制剂。 二、器材： 恒温水浴 试管及试管架 三、试剂和材料： 0.1％的淀粉溶液 150ml 稀释200倍的新鲜唾液 150ml 1％NaCl溶液 50ml 1％硫酸铜溶液 50ml 1％硫酸钠溶液