CRISPR_Cas9介导的基因编辑技术研究进展_李聪_曹文广.pdfVIP

生 物 工 程 学 报 李聪 等/ CRISPR/Cas9 介导的基因编辑技术研究进展 1 Chinese Journal of Biotechnology /cjbcn October 25, 2015, 31( 10): 1−12 DOI: 10.13345/j.cjb.140589 ©2015 Chin J Biotech, All rights reserved 综 述 CRISPR/Cas9 介导的基因编辑技术研究进展 李聪，曹文广 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所，北京 100193 李聪, 曹文广. CRISPR/Cas9 介导的基因编辑技术研究进展. 生物工程学报, 2015, 31(6): 1– 12. Li C, Cao WG. Advances in CRISPR/Cas9 -mediated gene editing . Chin J Biotech, 2015, 3 1(6): 1– 12 . 摘 要: CRISPR/Cas9 (Clustered regulatory interspaced short palindromic repeats/CRISPR -associated protein 9)是 最近发现的一种新型的基因组定点编辑技术。CRISPR (Clustered regulatory interspaced short palindromic repeat s) 即成簇的、有规律的、间隔短回文重复序列，是人们在研究大肠杆菌编码的碱性磷酸酶基因时发现的，它原本 是存在于细菌和古细菌基因组中含有多个短重复序列的基因位点，能够为自身提供一种特异性免疫保护机制， 抵御外来病毒、质粒等遗传元件的入侵。CRISPR 系统主要依赖 crRNA (CRISPR RNA) 和 tracrRNA (Trans-activating chimeric RNA) 结合并导向Cas (CRISPR-associated system) 蛋白来对外源DNA 进行序列特异 性降解。目前已经发现了3 种类型的CRISPR/Cas 系统：Ⅰ型、Ⅱ型和Ⅲ型。其中Ⅱ型系统组分较为简单，主 要依赖的是 Cas9 核心蛋白，在 RNA 的介导下，Cas9 蛋白能够识别靶序列进行切割造成 DNA 的双链断裂 (Double-strand breaks ，DSB)。在此基础上，人们可以对基因组的特定位点进行基因打靶、基因定点插入、基 因修复等各种遗传操作。这种新的基因组定点编辑技术比类转录激活因子效应物核酸酶 (Transcription activator-like effector nuclease ，TALEN) 和锌指核酸酶 (Zinc-finger nuclease ，ZFN) 技术设计更加简单、更容 易操作，势必会有更广泛的应用。目前，利用该技术已在多个物种的细胞和个体水平上实现了遗传操作。文章 将从CRISPR/Cas9 的来源、结构、作用机理方面介绍其研究进展，为开展这一领域的研究工作提供参考。 关键词: 基因编辑，CRISPR/Cas9 系统，单链向导RNA ，脱靶效应 Received: November 30, 2014; Accepted: February 13, 2015 Supported by: National Transgenic Major Program (Nos. 2013ZX08008 -003, 2014ZX08008-003). Corresponding author: Wenguang Cao . Tel: +86-10 E-mail: ggwcao@163.com 国家转基因重大专项 (Nos. 2013ZX08008 -003, 2014ZX08008-003) 资助。 2015-04-16 16:54 /kcms/detail/11.1998.Q1654.001.html