无菌检验操作规程..docVIP

医疗器械产品无菌检验操作规程 1目的 通过无菌检验,确保灭菌后产品能够达到无菌的要求。 2适用范围 适用于灭菌后医疗器械产品的无菌检验。 3检验依据 《中国药典》 (2005年版 GB14233.2-2005医用输液、输血、注射器具检验方法第二部分:生物试验方法 GB15980-1995一次性使用医疗用品卫生标准 4仪器、设备 超净工作台、电热干燥箱、电热恒温培养箱、霉菌培养箱、压力蒸汽灭菌器、集 菌仪(器 、电子天平、 PH 计、冰箱、恒温水浴锅、酒精灯、三角烧瓶,接种环、 无菌棉签、镊子,试管架,大试管若干等。 5无菌检验室的环境要求 5.1无菌检验应在环境洁净度 10000级下的局部百级的单向流空气区域内进行。 5.2缓冲区与外界环境、无菌检验室与缓冲区之间空气应保持正压,阳性对照室 与缓冲区之间空气应保持负压。无菌检验室与室外大气之间静压差应大于 10Pa 。无 菌检验室的室温应保持 18~26℃,相对湿度:45~65%。 5.3无菌检验室的单向流空气区、 工作台面及环境应定期按 《医药工业洁净室 (区 悬浮粒子、浮游菌和沉降菌的测试方法》的现行国家标准进行悬浮粒子、浮游菌和 沉降菌的监测。每年至少检测一次。 5.4无菌检验过程中应同时检查超净工作台单向流空气中的菌落数:每次操作时 在层流空气所及台面的左中右置 3个营养琼脂平板,暴露 30min ,于 30~35℃培养 48小时,菌落数平均应不超过 1CFU/平板。 6无菌检验前的准备 6.1器具灭菌、消毒 6.1.1灭菌:试验过程中与供试品接触的所有器具必须采用可靠方法灭菌。可经 电热干燥箱 160℃以上干烤 2小时,或置压力蒸汽灭菌器内 121℃蒸汽灭菌 30分钟 后使用(根据灭菌效果验证决定灭菌参数 。所有的灭菌物品不应超过 2周即用毕, 否则应重新灭菌。 6.1.2消毒:凡检验中使用的器材无法灭菌处理的,使用前必须经消毒处理。如 无菌检验室的试管架、电子天平、工作台面、工作人员的手、橡胶吸头等。可采用 消毒剂浸泡或擦拭。消毒剂应每月更换,以防止产生耐药菌株。 6.1.3标识:器具的灭菌、消毒后必须做好标识,标明灭菌、消毒时间和使用有 效期。 6.2人员、物料进入无菌检验室 6.2.1开启紫外线灯或臭氧发生器进行空间灭菌处理,消毒时间不得少于 30min 。 6.2.2物料进入无菌检验室流程 6.2.2.1脱包:进入无菌检验室的物品若有双重包装的,需将外包装在传递窗 /缓 冲间拆除后,传入试验室。 6.2.2.2消毒:进入无菌操作室的所有培养基、 供试品等的外表都应采用适用的方 法进行消毒处理,以避免将外包装污染的微生物带入无菌检验室。 6.2.2.3传递:查看所有进入无菌检验室的器具上的灭菌、 消毒标识, 是否在有效 期内。符合要求的经传递窗传入无菌检验室。 6.2.3人员进入无菌检验室流程 6.2.3.1更鞋脱衣:在一更区脱去一般区工作鞋, 穿上无菌检验室工作鞋; 脱去一 般区工作服。 6.2.3.2洗手:首先用肥皂或洗手液在手上揉擦出泡沫, 再用流水连续冲洗 20秒, 洗净泡沫。 6.2.3.3更衣:在二更区按照从上到下的顺序穿戴无菌工作服(包括衣、帽、 口罩 等 ,要求裤子掖在上衣里,口罩掩住口鼻,帽子包裹所有头发。 6.2.3.4手消毒:用消毒液浸泡双手 5秒以上或用浸过消毒液的棉球擦拭双手。 消 毒液可用洗必泰、新洁尔灭、碘伏、 75%酒精等。 6.2.3.5人员进入:经缓冲间进入无菌检验室。 6.2.4人员进入无菌检验室后,进一步用消毒液擦拭工作台面,戴无菌手套。 7无菌检验操作要求 7.1全过程必须严格执行无菌操作,防止微生物污染。 7.2使用玻璃器皿应轻取轻放,避免破损,以防培养物扩散。 7.3所有操作均应在近火焰区进行,且不得有大幅度或快速动作,以免搅动空气 中的尘埃微粒。 7.4使用金属接种器具时,用前、用后均需灼烧灭菌。 7.5在接种培养物时,动作应轻、准,防止培养物溅出,产生汽溶胶,造成污染。 7.6操作过程中所有的带菌物品,用后均应作消毒、灭菌处理。可在检验过程中 随用随时放入消毒液缸内浸泡或消毒桶内,或在检验完成后经传递窗传至一般区, 立即用压力蒸汽灭菌锅 121℃灭菌 30分钟。 8培养基制备 8.1需气菌、厌气菌培养基(硫乙醇酸盐流体培养基的制备 8.1.1所用试剂 酪胨(胰酶水解 15.0%葡萄糖 5.0g L-胱氨酸 0.5g 硫乙醇酸钠 0.5g (或硫乙醇 酸 (0.3ml 酵母浸出粉 5.0g 氯化钠 2.5g 新配制的 0.1%刃天青溶液 1.0ml 琼脂 0.75g 水 1000ml 8.1.2制备 除葡萄糖和刃天青溶液外,取上述成分混合,微温溶解,调节 pH 为弱碱性,煮 沸,滤清,加入葡萄糖和刃天青溶液,摇匀,