课件：第七章++基因治疗.ppt

人类MDR1基因产生一种糖蛋白P-gp, 是ATP结合蛋白，对多种抗肿瘤药物产生外排作用。 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? 造血干细胞 肿瘤细胞 糖蛋白 5. 抑制血管肿瘤生成 肿瘤的生长和存活依赖于生成的血管为它所提供的氧气和营养物质，阻断肿瘤血管的生成可以抑制肿瘤的生长，防止肿瘤的转移。 VEGF是肿瘤诱导血管生成过程中的一个重要的调节因子，引入反义VEGF的cDNA基因，通过与VEGF的mRNA结合，来抑制VEGF蛋白的翻译。 VEGF促进血管生成 VEGF过表达载体植入小鼠角膜诱发异常的血管发生。 RAC基因的过表达可以明显抑制VEGF的血管发生诱导作用。 Circulation. 2003;107:1532-1538 三 病毒病的基因治疗 病毒性肝炎 艾滋病（获得性免疫缺陷综合症） 1. 病毒性肝炎 主要由肝炎病毒引起，包括甲型肝炎病毒HAV，乙型肝炎病毒HBV，丙型肝炎病毒HCV，丁型肝炎病毒HDV，戊型肝炎病毒HEV。其中主要是HBV和HCV感染较多。 治疗的根本方法是阻断、抑制甚至是清除肝炎病毒。 采用核酶、反义寡核苷酸、显性失活突变体等方式均可抑制HBV或HCV病毒的基因复制和表达。 艾滋病（AIDS） 艾滋病又叫获得性免疫缺陷综合症 由艾滋病病毒HIV感染引起 。HIV侵入人体后破坏人体免疫功能，使人体发生多种不可治愈的感染和肿瘤，最后导致被感染者死亡的一种严重传染病。 HIV病毒的分子结构 HIV模型图 脂双层膜 gp120 gp41 包膜糖蛋白 p24衣壳蛋白 p14内膜蛋白 p7核衣壳蛋白 逆转录酶 蛋白酶 整合酶 HIV基因组结构： 由两条单链RNA组成，每个RNA基因组约为9.7k，在RNA5′端有一帽结构（m7G5ppp5’GmpNp）, 3′端有poly（A）尾巴。HIV的主要基因结构和组合形式与其他反转录病毒相同，均由5′末端长重复（long terminal repeat， LTR）、结构蛋白编码区（gag）、蛋白酶编码区（pro）、具有多种酶活性的蛋白编码区（pol）、外膜蛋白（env）和3′末端的长重复LTR区组成。 HIV较其他反转录病毒复杂，因为它有较多的调节基因，HIV1基因编码区有很多重叠，尤其在基因组3′端。其部分基因如Tat和Rev是不连续的，被插入的内含子分隔成两个外显子。HIV1至少有4个功能性的剪接供体位点和6个剪接受位点. HIV的生活周期： 亲代病毒 → 与细胞表面CD4分子结合→ 进入细胞→ 脱去核心蛋白→ cDNA→ 进入细胞核形成环状DNA→ 整合进染色体DNA→ 原病毒→ 转录成mRNA→ 子代病毒RNA→ 组装成病毒颗粒→ 病毒释放→ 子代病毒 艾滋病的致病原因 HIV主要通过其表面的包膜糖蛋白与宿主细胞CD4结合，在CCR5或CXCR-4等辅助受体协同帮助下，与细胞膜融合，病毒核心进入细胞内，病毒RNA在逆转录酶作用下合成前病毒。一方面病毒以出芽方式从细胞释放形成新病毒，并感染新细胞，另一方面前病毒与细胞DNA整合而呈潜伏状态。最终导致CD4＋T淋巴细胞破坏与衰竭，导致机体免疫力下降。 艾滋病的治疗 阻断HIV病毒进入细胞的策略就是用过量的CD4抗原分子或HIV的包膜糖蛋白gp120，来阻断和抑制HIV的感染能力，保护未受感染的CD4＋细胞。 将可溶性的CD4＋(sCD4)分子的编码基因导入到体外培养的T淋巴细胞中，sCD4分子确实可以阻断HIV－1的感染。 单链可变区抗体，负显性抑制蛋白，RNA诱捕，细胞内自杀或RNA干涉等方法均可以从不同方面来开展AIDS的基因治疗。 RNAi：RNA干涉技术 RNAi（RNA interference，即RNA干涉）是指通过反义RNA与正链RNA形成双链RNA特异性地抑制靶基因的转录后表达的现象，它通过人为地引入与内源靶基因具有同源序列的双链RNA（有义RNA和反义RNA），从而诱导内源靶基因的mRNA降解，达到阻止基因表达的目的。 RNAi现象首先是１９９８年在线虫中发现。 RNA干涉的机制 RNAi的应用 基因功能鉴定与功能基因组学 基因调控机制的研究 药物开发与基因治疗：针对HIV－1基因组不同区域构建表达质粒，其产生的小干涉RNA在人细胞系和初级淋巴细胞中均能够抑制HIV－1的早期和晚期复制。 后面内容直接删除就行 资料可以编辑修改使用 资料可以编辑修改使用 资料仅供参考，实际情况实际分析 主要经营：课件设计，文档制作，网络软件设计、图文设计制作、发布广告等 秉着以优质的服务对待每一位客户，做到让客户满意！ 致力于数据挖掘，合同简历、论文写作、PPT