嗜热自养甲烷杆菌二硫键异构酶活性位点特征-应用与环境生物学报.PDF

2017-10-25 DOI: 10.3724/SP.J.1145.2016.10011 / Chin J Appl Environ Biol 2017 23 ( 5 ) : 0862-0865 应用与环境生物学报 ， 嗜热自养甲烷杆菌二硫键异构酶活性位点特征* 1 2 1 1 1 1 1 1** 刘松娇 谢红卫 毛立晖 刘聪 韦海波 吴雨辰 余扬帆 丁霞 1南昌大学生命科学学院 南昌 330031 2江西省农业科学院 南昌 330000 MtPDI 摘 要 嗜热自养甲烷杆菌二硫键异构酶（ ）催化蛋白质二硫键的形成和异构化，具有分子伴侣活性，在宿主热 损伤保护中具有关键性作用. 为研究MtPDI活性结构域中的关键氨基酸位点，通过生物信息学预测MtPDI 的活性结 构域（C PAC MtPDI C74 C77 74 77 ），通过定点突变分析其对二硫键异构酶酶活性的影响. 结果显示： 活性结构域中 、 位点 MtPDI (C74S) MtPDI (C77S) MtPDI (C74S/C77S) 32.2% 40.7% 进行突变后， 、 、 的还原酶活性都明显降低，分别降低 、 和 51.2% MtPDI (C74S) MtPDI (C77S) MtPDI (C74S/C77S) ，双突变的酶活影响大于单点突变. 热处理后，突变体 、 、 对大肠杆 菌的热损伤保护明显低于MtPDI. 本研究表明C74和C77是自养甲烷杆菌二硫键异构酶活性区域关键氨基酸，可为深入 研究嗜热古菌二硫键的功能和嗜热自养甲烷杆菌抗胁迫机理提供基础. （图4 表 1 参26 ） 关键词 嗜热自养甲烷杆菌；二硫键异构酶；点突变；还原酶活性；热耐受性 CLC Q936 Characterization of the active sites of protein disulfide isomerase from the archaea Methanothermobacter thermautotrophicus * 1 2 1 1 1 1 1 1** LIU Songjiao , XIE Hongwei , MAO Lihui , LIU Cong , WEI Haibo , WU Yuchen , YU Yangfan DING Xia 1 College of Life Sc