进出口食品中厌氧亚硫酸盐还原梭状芽孢杆菌 编制说明.docVIP

PAGE \* MERGEFORMAT 1 1 基本信息 1.1 标准草案名称 中文 进出口食品中厌氧亚硫酸盐还原梭状芽孢杆菌 英文 Method for the determination of anaerobic Sulfite-reducing clostridia in food for import and export 1.2 与国际标准和国外先进标准一致程度情况 等同 修改 非等效 标准号 英文名称 中文名称 1.3 任务来源 批准立项的文件名称和文件号 计划编号 2010B377r 1.4 制（修）订情况 制订 修订√ 替代的标准编号 SN/T0172-2002 1.5 起止时间 2010年1月～2011年12月 1.6 起草单位 辽宁出入境检验检疫局 1.7 起草人 曹际娟、王金玲、张莹、徐君怡、李俊环 1.8 专业类别 √1、食品（化妆品）检验；2、卫生检疫；3、动物检疫；4、植物检疫； 5、纺织产品检验；6、轻工产品检验；7、机电产品检验；8、化工、矿产品和金属材料检验；9、管理；10、鉴定；11包装及危险化学品 1.9 标准体系表代码 1.10 调整情况 无 2 背景情况 2.1 目的、意义 厌氧亚硫酸盐还原梭状芽孢杆菌（Anaerobic Sulfite-reducing clostridia）是梭状芽胞杆菌属的一群细菌，而不是一个生物学分类单位。多指厌氧芽胞杆菌，代表性菌株是致黑梭状芽胞杆菌，其他常见的还有产气荚膜梭菌、肉毒梭菌、破伤风梭菌等。此类细菌的主要特征是将亚硫酸盐还原为硫化物，多为有动力的革兰氏阳性菌，可形成芽胞，厌氧生长。厌氧亚硫酸盐还原菌的孢子在自然环境中广泛存在，通常出现在人和动物的粪便排泄物，废水和土壤中。与大肠杆菌和其它杆菌不同的是，由于它们的孢子比营养体对物理和化学因子具有更强的抵抗力，所以可以在自然环境中存活很大时间。因而，通常将他们作为长期污染或间断污染的指示菌。它们甚至可以抵抗正常水处理所用氯的工作浓度，因此，它们对判断是否已达到控制目的非常有用。由于此类细菌抵抗力强，即使在经适当加工处理的加工食品中其芽胞仍会存活，条件适宜时又会生长繁殖，造成食品品质降低或腐败，甚至会引起食物中毒的危险。因此在食品的制备、贮存以及食品加工厂环境卫生控制上颇受重视，作为食品、矿泉水、加工设备卫生、生产环境的卫生状况的评估指标，正确得到越来越广泛的应用。 厌氧亚硫酸盐还原梭状芽孢杆菌的检验采用平板计数法和最近似值（MPN）法，已广泛用于进出口食品中厌氧亚硫酸盐还原梭状芽孢杆菌的检验。该方法灵敏度和准确性都很高，特别适合在出入境检验检疫实验室中推广。 2.2 与国内外相关标准、文献的关系 3 编制过程 3.1 准备阶段（可选项） 3.2 分工情况 3.3 标准草案编写情况 范围、规范性引用文件、定义、设备和材料、培养基和试剂、样品的贮存和运输、样品制备、检验步骤与计算、证实试验、附录A、附录B。主要技术要点是样品经处理后，进行系列稀释，通过平板计数法和最近似值（MPN）法确定样品中厌氧亚硫酸盐还原梭状芽孢杆菌的CFU/g(mL)或MPN/g(mL)的量。 3.4 征求意见情况（适用于送审稿） 3.5 审定情况 （适用于报批稿） 3.6 预期的管理目标（适用于规程类标准）或技术指标（适用于方法类标准） 4 主要技术内容的确定 4.1厌氧亚硫酸盐还原梭状芽孢杆菌——平板计数法 4.1.1 产气荚膜梭菌ATCC13124 4.1 鲜鱼、冻牛肉、冻鸡肉、熟鸡肉串、冷冻白菜各25g，分别加入1mL培养24h的产气荚膜梭菌ATCC13124。 4.1.3 实验试剂 亚硫酸铁琼脂（北京陆桥100203）、庖肉培养基基础（北京陆桥110121）、牛肉粒（北京陆桥110522）、细菌琼脂粉（北京陆桥100520）、厌氧袋（美国BD）。 4.1.4 实验设备 恒温培养箱shellab L120-2、拍击式均质器Interscience 400VW、天平BSA2202S-CW、恒温水浴锅DK-8D。 4.1.5 实验方法 培养温度、培养时间 取产气荚膜梭菌ATCC13124增菌液，从100稀释至10-7，每个稀释度分别取1mL加入到4个无菌平皿中，每个平皿加入约15mL冷却至50℃的亚硫酸铁琼脂培养基，待混合物凝固后,再倾注10mL2%无菌琼脂于已凝固的培养基上作为隔层。待该隔层凝固后，将制备好的平板每个稀释度2个一组，分别放于35℃、37℃，厌氧培养24h、48 表1在不同培养温度、不同培养时间细菌数量 培养温度 35 37 培养时间 24h 48h 72h 24h 48h 72h 平板计数法CFU/mL 3.0×104 9.2×104 9.2×104 2.0×105 6.8×10