纤维蛋白降解产物D-二聚体.doc

PAGE PAGE 1 纤维蛋白降解产物D-二聚体 一、人体纤溶系统及D-二聚体生成 生理学背景 纤维蛋白溶解系统(fibrinolysissystem)是人体最重要的抗凝系统，由４种主要部分组成：纤溶酶原(plasmingen)、纤溶酶原激活剂(plasmingenactivator,如t-PA,u-PA)、纤溶酶(plasmin)、纤溶酶抑制物(plasminactivatorinhibitor,PAI-1,antiplasmin)。当纤维蛋白凝结块(fibrinclot)形成时，在tPA的存在下,纤溶酶原激活转化为纤溶酶,纤维蛋白溶解过程开始,纤溶酶降解纤维蛋白凝结块形成各种可溶片段,形成纤维蛋白产物(FDP)，FDP由下列物质：X-寡聚体(X-oligomer)、D-二聚体(D-Dimer)、中间片段(Intermediatefragments)、片段E(FragmentE)组成。其中,X-寡聚体和D-聚体均含D-二聚体单位。 人体纤溶系统，它对保持血管壁的正常通透性，维持血液的流动状态和组织修复起着重要作用。D-二聚体血浆中水平增高说明存在继发性纤溶过程，而先生凝血酶,后又有纤溶系活化；并且也反映在血栓形成的局部纤溶酶活性或浓度超过血浆2‰─抗纤溶酶活性或浓度。溶栓治疗是指用药物来活化纤维蛋白溶解系统。一般为投入一种纤溶酶原活化物如尿液酶、链激酶或组织型纤溶酶原活化物(tpA)，使大量纤溶酶生成，从而加速已形成血栓的溶解。FDP或D-二聚体生成，则表明达到溶栓效果。 纤溶蛋白降解产物中，唯D-二聚体交联碎片可反映血栓形成后的溶栓活性。因此,理论上，D-二聚体的定量检测可定量反映药物的溶栓效果、及可用于诊断、筛选新形成的血栓。但是，到目前为止，商品的D-二聚体检测手段都尚存在一定局限性。其中D-二聚体的胶体金免疫过滤检测法，由于其快速测定、灵敏度高、阴性预报值高，重复性良好，临床医师较多采用。 二、D-二聚体测定临床意义及临床应用 测定纤溶系统主要因子，对于诊断与治疗纤溶系统疾病(如DIC,各种血栓)及与纤溶系统有关疾病(如肿瘤,妊娠综合症),以及溶栓治疗监测,有着重要的意义。 纤维蛋白降解产物D的水平升高，表明体内存在着频繁的纤维蛋白降解过程。因此，纤维D-二聚体是深静脉血栓(DVT)，肺栓塞(PE)，弥漫性血管内凝血(DIC)的关键指标。 临床应用： 深静脉血栓(DVT)诊断 比较研究表明,NycoCardD-Dimer和ELISAD-Dimer在诊断深静脉血栓的阴性判断上与静脉造影法相比,结果一致性与灵敏度接近100%。而胶乳法灵敏度仅为73%,结果一致性为78%。 NycoCardD-Dimer，是DVT早期诊断与阳性排除的重要工具。简便、快速，节约费用。 □肺栓塞(PE)和动脉血栓塞的诊断 □弥漫性血管内凝血(DIC)的诊断 □纤溶作用机制的早期测验－血栓前危险评价 □妊娠高危症与先兆子痫 □血栓形成过程及溶栓治疗的监测 □肿瘤辅助诊断 三、D-二聚体测定较FDP测定的优点 D-二聚体可作为溶栓效果的定量监测指标，而FDP(纤溶蛋白/原降解产物)可来自纤维蛋白原，且在原发性纤溶中也升高。因此后者不能作为溶栓效果的定量指标。但是，金乳胶显色的D-二聚体免疫过滤法由于对各种复合有D-二聚体的片断，如来自纤溶蛋白的X碎片复合D-二聚体均敏感，因此使试验的特异性降低。该测定法在定量检测中的实际临床意义尚有待更多临床实践资料的证明。 D-二聚体或FDP测定都可作为溶活性增强的某些疾病的辅助诊断，例如DVT、DIC肾功能、衰竭及溶栓疗效判断。理论上，DIC说明纤溶形成的小碎片对FDP检测法不敏感，而D-二聚体试验较之敏感。因此某一具体测定方法在疾病后中的敏感性尚有待临床资料的结论。 D-二聚体可采用血凝标本(血浆),而FDP是能采用血清标本。后者受血清制备是否完全的影响。 FDP乳胶颗粒法3分钟完成试验,D-二聚体胶体金免疫过滤法2分钟完成试验。前者为半定量测定,后者若采用读数仪可与ELISA法比美。 四、D-二聚体的测定方法 乳胶凝集法 原理:被检血浆中D-二聚体与包被在乳胶颗粒上的单抗相作用,产生絮状沉淀反应。 优点:快速 缺点:定性实验;半定量测定须多次倍比稀释测定费试剂,且结果重复性差。 酶联免疫吸附法(ELISA) 原理:采用2个针对D-二聚体的单抗建立的抗原为中心,两种抗体夹心法,并加入辣根过氧化酶的底物以作显色反应。 缺点: 1)抗体与纤维蛋白(原)的D片断有部分反应。一般情况下D片断吸有一个抗体结合部位,因此不再与带显色物的抗体结合,但有时挂钩现象干涉实验结果。 2)操作步骤复杂、费时,抗原抗体反应受温度时间影响。 3)每次实验需带标准曲线,因此需留一批标本同时测定,不适用于临床病人及时诊断