HLA-B27抗原检测在诊断AS中的意义.doc

PAGE PAGE 1 HLA-B27抗原检测在诊断AS中的意义 邓小军，谢志雄，张阳根 ［关键词］流式细胞术；强直性脊柱炎；HLA睟27 ［摘要］目的：探讨HLA睟27抗原检测在临床诊断强直性脊柱炎（AS）的意义。方法：应用流式细胞仪对189例门诊以及住院疑似AS患者进行检测。采用1984年的纽约修订的AS诊断标准对研究对象进行诊断。结果：受检189例中，HLA睟27阳性检出率为43.3%(82/189)。按照纽约标准诊断为AS的84例患者中，HLA睟27阳性率为91.7%（77/84）。HLA睟27检测对诊断AS的敏感度为91.7%（77/84），特异度为95.2%（100/105），诊断正确率为93.7%［（100+77)/189］。结论：HLA睟27和AS有很强的相关性，而用流式细胞术进行检测是较好的方法。 TheSignificanceofHLA睟27TestinginClinicalDiagnosisofAnkylosingSpondysis DENGXiao瞛un，XIEZhi瞲iong，ZHANGYang瞘en (The175thHospitalofPLA，Zhangzhou,Fujian363000，China) Abstract:ObjectiveTodiscussthesignificanceofHLA睟27testinginclinicaldiagnosisofankylosingspondysis(AS).MethodsDetecttheHLA睟27antigenof189patientswithflowCytometer(FCM)，andthejudgeofASrelytothestandardeditedinNewYork,1984.ResultsTheHLA睟27positiverateofallpatientsis43.3%(82/189)，andinthoseASpatients(relytothestandard),theHLA睟27positiverateis91.7%（77/84），thesensitiveofHLA睟27antigenindiagnosisofASis91.7%（77/84），andthespecificityis95.2%（100/105），theaccuracyis93.7%（100+77/189）.ConclusionTheHLA睟27ishighlyrelatedtotheAS,andtheflowcytometryisagoodmethodofHLA睟27testing. Keywords:Flowcytometry；Ankylosingsondysis(AS)；HLA睟27 HLA抗原是人类主要组织相容性复合体（MajorHistocompatibityComplex，MHC）的表达产物，在免疫系统中主要负责细胞之间的相互识别和诱导免疫反应，调节免疫应答的功能。HLA睟27基因属于Ⅰ型MHC基因。人们很早就发现HLA睟27抗原的表达与强直性脊柱炎（AnkylosingPondysis,AS）有着高度相关性，而AS由于其症状与许多疾病相似而难以确诊，因此HLA睟27的检测在病情的诊断中有着重要意义。本文对流式细胞仪检测HLA睟27抗原进行分析，探讨其应用价值，现报告如下。 1材料与方法 1.1调查对象 189例患者来自于2005年2月到2005年9月骨科门诊以及住院病例，其中男136例，女53例，平均年龄28.9岁，20岁以下42例，20岁~30岁102例，30岁~40岁36例，40岁以上9例。其中有84例经过诊断确定为AS患者（采用1984年的纽约修订的AS诊断标准对研究对象进行诊断）。 1.2仪器与试剂 仪器采用美国BD公司生产FACSCalibur流式细胞仪，HLA睟27荧光抗体F1(FITC)、CD3荧光抗体F2(PE)、校准微球和溶血素均来自BD公司标准试剂盒。 1.3方法 操作按试剂盒要求,将30μl荧光抗体(含抗B27和抗CD3)加入到FCM专用试管底部,再加入抗凝血50μl,混匀后室温避光15min,然后加溶血素2ml,混匀后室温避光10min,1500r/min离心5min,弃上清加PBS液2ml,混匀1500r/min离心5min,弃上清加PBS液500μl,混匀后待测（每次检测之前均使用校准微球通过FASComp软件对仪器进行校准）。 1.4采用FCM自带的数据获取与分析软件获取数据并进行分析 如图1所示，先通过对淋巴细胞的获取然后对CD3+T淋巴细胞设门，再通过软件计算FSC睩L2门内细胞抗HLA睟27FL1信号的平均荧光强度,并与界值相比较,如果大于(或等于)仪器设定的界值(界值由BD公司提供),报告为HLA睟27阳性