血液病患儿骨髓细胞DNA变异的临床意义探讨.doc

PAGE PAGE 1 血液病患儿骨髓细胞DNA变异的临床意义探讨 【摘要】目的探讨小儿常见血液病骨髓细胞变异的临床意义。方法应用流式细胞仪测定54例血液病患儿骨髓单个核细胞的DNA含量，计算细胞周期各时相比例。结果白血病组异倍体检出率明显高于非白血病组。12例非白血病中4例为异倍体，其中2例癌变。白血病组骨髓细胞S%明显低于对照组。3例接受治疗的急性淋巴细胞性白血病患儿达到完全缓解后，其S%明显高于治疗前，非白血病组的骨髓细胞周期与正常对照组差异无显著性。结论检测常见小儿血液病DNA可为临床诊断、判断其预后及其治疗提供客观的参考数据。 　　关键词常见血液病DNA变异异倍体细胞周期 　　ClinicalsignificanceofDNAvariationofmarrowcell 　　inthecommonblooddiseaseinchildren 　　LiZhongyi 　　TheCentralHospitalofJianghanOilFieldQiangjiangHubeiProv.433124. 　【Abstract】ObjectiveTostudytheclinicalsignificanceofDNAvariationofmarrowcellinthecommonblooddiseaseinchildren.MethodsWehavedetectedtheDNAquantityofMNLLin54childrenpatientswiththecommonblooddiseasebyflowcytometry，andcountedtheratioofanytimelydifferenceincellcycle.ResultsThedeˉtectionratioofheteroploidyinleukemiachildrenwasmorethanthatinnon-leukemia.Fourof12patientswithnon-leukemiawereheteroploidy，2of4wereprecancerouslesion.TheS%ofmarrowcellofleukemiawassignificantlesserthanthatofcontrol.ThreeacutelymphocyticleukemiaweregotCR，anditsS%wasmorethanthatbeforetherapy.Therewerenosignificancebetweenthemarrowcellcycleofnon-leukemiaandthenormalcontrol.ConclusionTodetecttheDNAinthecommonblooddiseaseinchildrencanprovideobjectiveparameterforclinicaldiagnosis，judgingprognosisanditstherapy. 　　KeywordscommonblooddiseaseDNAvariationheteroploidycellcycle 　　为探讨血液病患儿DNA的变异，我们采用流式细胞仪（FCM）检测54例血液病患儿骨髓单个核细胞（MNLL）的DNA含量，以分析其倍体水平及细胞增殖周期，进一步探讨其临床意义。 　　1对象与方法 　　1.1对象（1）急性白血病组（AL）:初诊为AL42例，其中急性淋巴细胞性白血病（ALL）22例，急性非淋巴细胞性白血病（ANLL）20例。（2）初诊为非白血病的常见血液病组12例:4例急性特发性血小板减少性紫癜（AITP），慢性特发性血小板减少性紫癜（CITP）、再生障碍性贫血（AA）、急性溶血性贫血各2例，营养性缺铁性贫血、粒细胞减少症各1例，均经临床及实验室检查确诊，年龄2～14岁，平均年龄6.5岁。（3）正常对照组15例，为骨髓象正常的儿童，年龄2～14年。平均年龄6.7岁。 　　1.2方法（1）样品制备:取肝素抗凝骨髓0.1ml，按常规方法分离MNC，每个测定管加骨髓细胞106个，然后依次加入DNA测定液（CoulterDNAKit），室温保存30min，然后加入PI染色液（终浓度为100μl/ml）。室温下30min后上机测定。（2）DNA测定方法:流式细胞仪FACscan（Coulter公司），15mW氩离子激光光源，发射波长488nm，每个样品测定10000个细胞，采用Coulter公司提供的DNA分析程序，获取各样本细胞周期时相百分比。流式细胞检测方法:采用Coulter公司生产的流式细胞仪FACscan进行参数检测，每个样本随机测定104个细胞，并求出细胞生长分数（%）=（S+G2/M）/（G1+S+G2/M）×100%，将测量的数据、