结核杆菌的耐药机制及分子生物学检测方法进展.doc

PAGE PAGE 1 结核杆菌的耐药机制及分子生物学检测方法进展 滕凤猛陈昌杰 （蚌埠医学院临床检验诊断中心，蚌埠233030） 【摘要】耐药结核病是当今全球结核病控制领域中的迫切课题，由于在结核病的治疗中忽视了治疗的管理，加之20世纪80年代以来，又受到HIV/AIDS感染流行的影响，结核菌耐药性与耐药结核病逐渐增多，甚至不少国家与地区发生多耐药结核病的暴发流行，因此进行结核分支杆菌的耐药性机制和检测研究，对有效的防治结核病，尤其是指导临床用药上，具有极其重要的意义。 【关键词】结核分支杆菌；耐药性机制 Developmentofmechanismsanddetectionmethodsinmolecularbiologyofdrug-resistentmycobacteriumtuberculosisTENGFengmeng，CHENChangjie.BangbuMedicinecollege，Bangbu233030，China 【Abstract】NowdaysdrugresistanttuberculosisisaexigentproblemofcontrolforTuberculosis.BecauseithadbeenignoredthatsuperviseinthetuberculosistherapyandtheinfluenceofHIV/AIDSsince1981s,Mycobacteriumtuberculosisanddrugresistancetuberculosisoccurmoreandmore,evenmultidrugresistanttuberculosisbreakoutprevailovermanycountryandarea,thereforestudyonmolecularmechanismsandrapiddetectionmethodsofdrugresistantmycobacteriumtuberculosisisespeciallyimportantforeffectivetuberculosistreatmentandinstructingclinicalmedication. 【Keywords】MycobacteriumTuberculosis；DrugResistanceMechanism 结核病困扰人类已有上千年的历史，至今仍是严重的公共问题。全世界因结核病而死亡的人数比所有传染病死亡的总和还要多，耐多药结核病（multidrugresistanttuberculosis,MDR-TB）则有可能使结核病再度成为“不治之症”，的流行更是加剧了全球结核病的流行。因此，对结核病耐药机制的检测研究，尤其是对结核病耐药快速检测方法的研究已成为迫切的需要。 1耐药结核杆菌的耐药机制 结核杆菌产生耐药性主要是由不合理用药引起的结核杆菌内抗结核药物作用靶基因突变所致[1]，结核杆菌发生耐药的机制目前从细胞机制与分子机制或细胞水平与分子水平上来分析。 1．1细胞水平上的耐药机制　 ①结核杆菌对抗结核药物的耐药概率不同，从而说明细菌对疗效最差的药物最易发生耐药。②抗结核药物防止耐药的效力不同。③病灶中细菌数量、药物应用数与耐药发生率的关系；病灶中结核杆菌数量越大，耐药的机会越多；用药数越多，耐药的机会越少。④优势学说和顺次选择学说，顺次选择学说是造成MDR的主要原因，也是造成MDR－TB的主要原因[2]。 1．2分子水平上的耐药机制 迄今为止，关于结核分支杆菌耐药性机制问题有3种观点：①细胞膜(壁)结构与组成发生变化，使细胞膜通透性改变，药物通透性降低，产生降解或灭活酶类，改变药物作用靶位。②质粒或转座子介导的耐药性，但结核分支杆菌是否存在质粒尚未得到确切的证据。③染色体突变介导的耐药，药物靶编码基因突变。近年国内外研究报告指出，耐药结核分支杆菌临床分离株药物靶编码基因发生突变，与耐药性密切相关，是结核分支杆菌耐药性的主要分子机制[2]。Jungblut等[3]采用2-DE和质谱技术，检测出了与异烟肼抗药性有关的蛋白。国内乐军等[4]采用2-DE及MALDI技术对异烟肼耐药的结核分支杆菌和敏感菌株进行比较蛋白质组学研究，发现了存在于耐药菌株的26个细胞壁蛋白，并鉴定了其中6个蛋白，推测可能是海藻糖-6-磷酸磷酸酶(putativetreha-lose-6-phosphatephosphatase)、铁钼蛋白(moaA)、莽草酸5-脱氢酶(putativeshikimate-5-dehydrogenase)、葡萄糖胺果糖-6-磷酸氨基转移酶(glucosamine-fructose-6-phosphateaminotrans-ferase)、吲哚-3-甘油磷酸合成酶(