各种方法人绒毛膜促性腺激素(HCG)检查.doc

PAGE PAGE 1 各种方法人绒毛膜促性腺激素(HCG)检查 有人询问血HCG含量(化学发光)在多少范围可以诊断为宫外孕?我找到这篇教材中关于HCG测定的资料给您参考。尚没有用化学发光技术测定血HCG诊断宫外孕的标准报道。一般说来，用HCG正常上升排除宫外孕的阳性预测值为约95%（正常妊娠每2-3天血清HCG浓度翻1倍），比较超声结果和HCG浓度也能估计宫外孕，HCG达1000U/L时，阴道超声应可识别出宫内孕囊，HCG必须达6500U/L时，腹部超声才能识别出宫内孕囊，如果不是这样，则应怀疑异位妊娠。 人绒毛膜促性腺激素(HCG)检查 　　成熟女性因受精的卵子移动到子宫腔内着床后，形成胚胎，在发育成长为胎儿过程中，胎盘合体滋养层细胞产生大量的人绒毛膜促性腺激素（humanchorionicgonadotropin,HCG），可通过孕妇血液循环而排泄到尿中。当妊娠1-2.5时，血清和尿中的HCG水平即可迅速升高，第8郛周达到高峰，至郛期第4个月始降至中等水平，并一直维持到妊娠末期。（图9-1） 图9-1正常妊娠妇女血清中HCG平均值 　　HCG是由两个非共价键相连的肽链组成的糖蛋白激素。其单个亚基不具有生物活性，当连接成完整化合物时始具活性，分子量约为4.7万。其主要功能就是刺激黄体，有利于雌激素和黄体酮持续分泌，以促进了宫蜕膜的形成，使胎盘生长成熟。HCGα亚单位的氨基酸排列与黄体生长激素（LH）α亚单位相似，故用完整的抗HCG分子的抗体测定HCG时与LH间有免疫交叉反应。但它们的β亚单位各不相同。因此为避免交叉反应，目前均采用高将近的抗β-HCG单克隆抗体进持特异的HCG检查，近年来还有报道采用抗β-HCG羧基末端肽单克隆抗体以进一步提高检测的敏感性和特异性。 　　（一）胶乳凝集抑制试验和血凝抑制试验 　　1960年Wide及Gemzell开始采用胶乳凝集抑制试验(latexagglutinationinhibitiontest,LAIT)技术测定尿中HCG，即将尿液与抗HCG血清作用后，加入已吸附抗原的胶乳，如尿中含HCG较多，则先与抗HCG结合，不再有多余的抗HCG与胶乳产生凝集而仍呈均匀的乳胶状，是为阳性。相反，不含HCG尿不与抗血清作用，当加入吸附抗原的胶乳后，抗血清可与胶乳抗原反应，出现明显的”特”特性凝集颗粒，即为阴性。也可利用血细胞的血凝抑制试验(hemoagglutinationinhibitiontest,HAIT)，其原理与胶乳法一致只是载体由胶乳改成羊红细胞。这两种试验方便简便，灵敏度为100-500Mu/ML，适合大批标本检查，但因特异性差，不能定量，已逐渐被单克隆抗体法所取代。 　　（二）放射免疫试验（RIA） 　　利用放射标记的HCG与被检测尿中的HCG竞争性地结合抗-HCG抗体，当被检尿中HCG增加时，结合物的放射性减低，与不同含量标准品对比可测尿中HCG的含量。使定量检测成为可能。 　　由于RIA需一定设备，试验手续繁甭，且有核素污染问题，不适用于临床常规应用。 　　（三）酶联免疫吸附试验（ELISA） 　　该方法目前已广泛应用于临床，其基本原理是运用夹心免疫酶分析技术。即采用HCG单克隆抗体包被于固相表面，样品中的HCG都将与支持物表面的抗体相结合。与样品一孵育后，冲洗耳恭听表面，然后加入特异性酶标抗β-HCG亚基的单克隆抗体，最后加入酶作用的基质，即产生颜色。该法可目测，灵感度为20-50Mu/ml,采用抗β-HCG单克隆抗体二点酶免疫法进行定量，灵敏度可达2-10mU/ml。目前免疫酶法进一步发展为更简便、适于病人自检的一步法，即免疫酶渗透试验。 　　（四）单克隆抗体胶体金试验 　　免疫胶体金法是将羊抗人HCG抗血清（多抗）、羊鼠IGG分别固定特制的纤维素试带上并呈两条线上下排列，羊抗鼠IGG线在试带知上方为阴性对照，羊抗人HCG多抗在下方为测定。试带条中含均匀分布的胶体金标记鼠抗人β-HCG单克隆抗体和无关的金标记鼠IGG。检测时将试带浸入被检尿液中（液面低于固定的两条抗体线）后迅速取出。尿液沿试带上行，尿中的β-HCG在上行过程中与胶体金标记单克隆抗体结合，待行至羊抗人HCG抗体线时，形成金标记的β-HCG单元抗尿HCG羊抗人HCG复合物而在试带上呈兹红色区带，为HCG阳性反应，试带上无关的金标记鼠IGG随尿液继续上行至羊抗鼠IGG处时与之形成紫红色的金标记的抗原体复合物是为阴性对照。判断结果时，含HCG的尿液试带可显示上、下两条紫红色线条，而阴性标本则只显出上边一条紫红色线。 　　[方法学评价]纵观HCG检查方法，有生物激动、化学法、免疫法等。几种不同的HCG检查方法比较见表9-1。免疫法的检测手段不断更新、向特异简便、快速、普及方向发展，现已有胶乳或血凝抑制试