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左卡尼汀口服溶液中的药物含量测定及光学异构体检查 沙延淳 邓波 石莉(通讯作者)杨红玉 杨祝仁 叶小辉(辽宁省药物研究院辽 宁沈阳110015) 【摘要】目的 建立了高效液相色谱法测定左卡尼汀口服溶液中左卡尼汀含量, 并建立了高效液相色谱法测定左卡尼汀口服溶液中左卡尼汀光学异构体。方法 采用Kromasil C18色谱柱(200mmtimes;4.6mm, 5mu;m)；流动相为磷酸盐缓 冲液［取磷酸11.5ml,加水稀释至1900ml,用氢氧化钠溶液(1.0ml/L)调节pH 値至2.4,加庚烷磺酸钠l.lg,振摇使溶解卜甲醇(900： 100)；流速为lml/min； 检测波长为225nrrio结果试验条件下，进样量在19.9mu;g^59.7mu;g范围 内线性关系良好(r二0.9998),平均回收率99.34%,精密度RSD为0.81%(n=6), 三批左卡尼汀含量分别为99.81%、98.31%和99.65%。未检出光学异构体。结论 HPLC法可快速、有效地分别检测左卡尼汀口服溶液中药物含量和光学异构体。 【关键词】左卡尼汀口服溶液高效液相色谱法含量测定光学异构体 卡尼汀(Carnitine)是1905年有两位俄国科学家在肌肉提取物中首次 发现的［1］,有左旋和右旋两种存在形式，只有左旋物才有生物活性。左卡尼汀 (Levocarnitine)又名左旋肉碱，化学名为L?3?轻基4氮?三甲氨基丁酸,是一种 广泛存在于机体组织内的特殊氨基酸，为脂肪代谢所必需。左卡尼汀口服溶液， 临床上用于治疗原发和继发左卡尼汀缺乏。休克及急慢性心功能不全、缺血性心 肌病、心肌心律失常、心绞痛、心肌梗死；急慢性肝炎，肝硬化，慢性肝功能不 全的辅助治疗；缺血性脑血管疾病；肌肉萎缩；糖尿病；慢性尿毒症尤其是长期 透析的患者；全肠外营养和创伤。也可用于减少抗肿瘤药物对心脏毒性和减少丙 戊酸的毒性(REYE-LIKE综合征)；新牛儿营养不良，产后子宫收缩不良的辅助治 疗。 木实验采用高效液相色谱法，分别对左卡尼汀口服溶液进行含量测定和 光学异构体检查。 Fig? 1 Structure of Levocarnitine 图1左卡尼汀化学结构式 1仪器与材料 日本岛津LC-10A高效液相色谱仪，SPD-10AV检测器，N2000色谱工作 站；Kromasil C18 色谱柱 200mmtimes;4.6mm, 5mu;m（北京迪马公司）；BP211D 电子天平（赛多利斯）。 左卡尼汀（东北制药集团股份有限公司，纯度质量分数ge;99%）,甲 醇（色谱纯，天津康科德试剂有限公司；批号,纯化水（自制），磷 酸、庚烷磺酸钠、三乙胺和冰醋酸均为分析纯。 2方法与结果 2.1左卡尼汀口服溶液的制备 将处方量的左卡尼汀、L■洒石酸、甜菊糖貳（质量比200:8:1）分别加水 溶解，混合，加水近全量时加入适量5%疑苯乙酯醇溶液和柠檬香精，加水至全 量，滤过，分装，湿热灭菌，即得。 2.2左卡尼汀口服溶液外观性状和pH值检查 按“2.1”项下方法制备的左卡尼汀口服溶液为无色的澄明液体；微香， 味甜。 取本品三批各5支，依法测定（中国药典2010年版二部附录IVH）, pH测定结 果见表lo Table 1 The value of pH 表1 pH值测定结果 2.3左卡尼汀口服溶液含量测定 2.3.1色谱条件 色谱柱：Kromasil C18 色谱柱 200mmtimes;4.6mm, 5mu;m （北京迪 马公司）；流动相：磷酸盐缓冲液［取磷酸11.5ml,加水稀释至1900ml,用氢氧 化钠溶液（l.Oml/L）调节pH値至2.4,加庚烷磺酸钠1?珂振摇使溶解卜甲醇（900： 100）；流速：lml/min；检测波长：225nm。 2.3.2空白试验 精密量取本品空白（辅料）溶液2ml,置100ml量瓶中，加水稀释至刻 度，精密量取20ul,注入色谱仪，试验表明空白（辅料）溶液对本品含量测定无 干扰。 2.3.3检测限和定量限 逐级稀释含量测定项下对照品溶液，测定样品峰的峰高，同时测定相同 条件下的色谱基线噪声，取基线噪声的3倍值作为最低检测限，求得本品的最低 检测限为0.04mu;g；取基线噪声的10倍值作为定量限，求得本品的定量限为 0.1mu;go 2.3.4线性关系考察 精密称取左卡尼汀对照品19.90mg,置5ml量瓶中，加水溶解并稀释至 刻度，摇匀，制成每lml含3.98mg的溶液。分别精密吸取5、7.5、10、12.5、 15mu;l,注入液相色谱仪中，测定色谱峰面积，以进样量为横坐标，色谱峰面 积为纵坐标，绘制标准曲线，冋归方程为Y=3949.8x+334,相关系数为0.9998。 结果表明，左卡尼汀进样量在19.9mu;g?