白鳃的同工酶研究遗传.PDF

遗传 HEREDITAS(Beijing)13(3);22-231991 白鳃 的 同工酶研 究1) 王 强 沈俊 宝 （中国水产科学研究院黑龙江水产研究所，哈尔滨，150076) 利用水平聚丙烯酞胺平板凝胶电泳，对白M的同工酶进行了分析。检查了心、肝、脑、肾、肠、肌肉、 鳃、鳍、眼和性腺共10种不同组织的7种酶 (LDH,MDH,ME,SOD,EST,GDH,ADH)o观察到了三个 LDH位点，其中一个有一对等位基因。还观察到了两个 MDH位点，三个 ME位点，一个EST位点， 一个 GDH 位点和一个 ADH 位点。 关键词：白醚，同工酶，电泳，器官组织 中国白链 (Hypophtha-dmicthysmolitrix) (40C）保存。使用LKB(2117）水平平板恒温电 是鲤科鱼类之一，广泛分布于黑龙江、长江和 泳仪，4.7%聚丙烯酸胺凝胶，Tris一柠檬酸缓 珠江、西江流域。经济价值很大。同工酶电泳 冲液。制胶缓冲液终浓度0.0025mol/L，电极 是生化遗传研究方法之一。不同种鱼的同工酶 缓冲液终浓度0.04mol压，上清液与指示剂 谱及器官分布特性有所不同“.9.10]。以前我国学 (0.4 澳酚蓝，25%蔗糖）混合后点样。每个 者在白维的形态学、繁殖习性及生态学等方面 点样孔加祥 10川，每一样品点二个孔作为重复 做了大量的研究工作，但有关白链的生化遗传 对照。ET:泳经过预电泳 （点样前，恒流 ，OmA, 方面的研究却很少。 虽然国外有人9对 白链 30分钟），前电泳 （点徉后，恒流20mA,10分 (Hypophthalmicthysnobilis）进行过研究，但 钟）及正式电泳恒（压900V,30-100分钟）。 对中国白链的多种组织进行较全面和系统的研 电泳过程中恒温4-C0 究 尚未见报道。本研究从 1986年7月起，利 （四）染色方法 参见Philipp等川‘和 用聚丙烯酸胺平板凝胶电泳对黑龙江白链的不 武内忠男21『，略改。EST染色液中，只使用a- 同器官进行了同工酶研究。目的在于对白链的 乙酸蔡醋，而不是同时使用a一乙酸茶醋和fl` 同工酶的器官分布进行较全面的了解，并为今 乙酸蔡醋。ME染色液中加人少量EDTA除去 后的研究提供可资借鉴的同工酶谱。 不利的阳离子。 材 料 和 方 法 结 果 与 讨 论 一（）实验用鱼 白鳞于 1986年7-9月 一（）乳酸脱氨酶(LDH,EC7) 间取自黑龙江水产研究所松浦实验场，均为3 乳酸脱氢酶为四聚体。对鱼类的乳酸脱氢 龄鱼。活鱼取各种组织，放于液氮瓶中，运回 酶同工酶的研究，前人已经做了许多工作 “030 实验室，转移到一30℃冰箱保存。 先后用鱼 硬骨鱼类都有A,B,C三个位点，四倍体鱼类还 30余尾。 有A,B或C的重复位点m。 二倍体硬骨鱼的 二（）实验试荆 均购自国内试剂商店。 A,B位点普遍存在于各种组织器官中，在同一 三（）电泳方法 每个样品称取0.2- 0.3克，按3m1/g的比例加蒸馏水，匀浆。离心 WangQ%angetal.:TheStudyontheIsozymesof SilverCarp (15000转／分，40C)20分钟，取上清液放冰箱 1)李丽坤同志参加了本研究的实验工作，特致谢欲。 种鱼的不同组织器官中没有质的差别，只有量 肝中表达最为强烈，显色深，显色快。虽然黑龙 的多少。C位点的器官分布，随鱼的不同而不 江白-0的醋酶A的同工酶谱 图（版1,4）比较复 同“0。 黑龙江白鳝的C位点只在肝组织 中表 杂，各种器官之间的谱型均不相同，但它们有一 达，A,B位点在各种器官中都有，均形成5条 个共同点，就是都有一条显色较深的主带。这 带，是典型的二倍体类型 （图版1,1)。这一结果 条主带被确认为醋酶A131，而其它的染色较浅