苏云金芽孢杆菌aiiA基因载体构建及石斛兰转化.pdfVIP

第48卷 第 1期 中山大学学报 (自然科学版) Vo1．48 No．1 2009年 1月 ACTA SCIENTIARUM NATURALIUM UNIVERSITATIS SUNYATSENI Jan． 2009 苏云金芽孢杆菌aliA基因载体构建及石斛兰转化 潘丽晶，张妙彬，梁擎中，范干群，程 萍 (珠海市农业科学研究中心，广东珠海519070) 摘 要：细菌性软腐病是石斛兰及其它兰花栽培和生产中的一大危害。苏云金芽孢杆菌Bacillusthuringiensis (Bt)中含有aiiA基因，该基因转入一些植物可赋予植物表现出软腐病抗性。从 菌中克隆出aiiA基因，并装 载人植物表达载体pCAMBIA1301，构建出可用于转入石斛兰的pSAN载体；首次利用根癌农杆菌EHA105将 pSAN载体转入石斛兰，并获得潮霉素抗性苗。这些抗性苗经GUS组织化学染色和PCR检测证实为转基因苗，这 将为获得具有软腐病抗性的石斛兰品种打下基础。 关键词：软腐病；aiiA基因；载体构建；根癌农杆菌；石斛兰转化 中图分类号：Q78 文献标识码：A 文章编号：0529—6579(2009)01—0067—05 ConstructionofVectorCarryingaiiA GeneofBacillusthuringiensis andTransformation ofDendrobium PANLijing，ZHANGMiaobin，LIANGQingzhong，FANGanqun，CHENGPi凡g (ZhuhaiAgriculturalScienceResearchCentre，Zhuhai519070，China) Abstract：SoftrotdiseaseisagreatthreattothecultivationandproductionofDendrobium andotheror。 chids．Bacillusthuringiensis(Bt)containsaiiAgeneencodingAiiAproteinwhichcouldenableplantsre— sistancetothesoft rotdisease．aiiA genewasamplified from Btandconstructedintothebinary vector pCAMBIA1301toconsturcttheexpressionvectorpSAN．Forthefirsttime，theaiiAgenewastransferred intoDendrobiumbyAgrobacteriumtumefacienEHA105．Through4一monthselectioncultivation，thehy— gromyein—resistantshootsregeneratedfromPLBs．SubjectedtoGUSassayandPCRanalysis，theshoots wereprovedtobetrna sformedshoots．Th isreserachworkmaycontributetocultivatenovelDendrobium specieswhichcouldresistanttosoftrotdisease． Keywords：softrot；aiiAgene；vectorconstruction；Agrobacteriumtumefacien；Dendrobiumtransformation 石斛属是兰科中最大的属之一 ，广泛分布于亚 生产，温室内种植密集，且常年温暖湿润，通风不 洲热带和亚热带地区至大洋洲。石斛兰因其种类繁 畅，极利于病虫繁殖和传播，管理稍有不慎便会引 多、花姿优美、花色艳丽、花期长，其中许多种类 发兰花病害，而多数病害一旦发生即对兰株造成永 还带有芳香的气味，既可盆栽观赏，又可做成切花 久的贬值，令生产者蒙受巨大的经济损失。 装饰，深受人们喜