Biochemistry B10RNA的生物合成和加工内容资料.pptVIP

;Chapter11 RNA的生物合成和加工;不同点： 复制 转录 模板 两股链均作为模板 模板链作为模板 原料 dNTP NTP 聚合酶 DNA聚合酶 RNA聚合酶 产物 子代DNA双链 mRNA;tRNA;rRNA 配对 A-T；G-C A-U；T-A；G-C 引物 需RNA引物 不需要引物 方式(特点) 半保留复制 不对称转录;（一）模板和酶;（一）模板和酶;反义链或负链;上游：Upstream 下游：Downstream 初级转录本：Primary transcript;2、 RNA聚合酶;（1）原核生物的RNA聚合酶 大肠杆菌;三种RNA聚合酶Ⅰ,Ⅱ,Ⅲ, 它们专一地转录不同的基因 其转录过程和产物已各不相同 三种RNA聚合酶对鹅膏覃碱的敏感性反应不同;（2）真核生物的RNA聚合酶;;3. RNA聚合酶与模板的辨认结合;采用足迹法确定启动子的位置和序列;足迹法试验证明;酶对启动子的识别是转录???第一步 大肠杆菌启动子：在转录开始位置的上游10个和35个核苷酸位置有两段DNA的序列比较保守，分别称为－10序列（－10 sequence）和－35序列（－35 sequence）。;开始转录;-35区的序列与起始点辨认有关，称为辨认位点 -10区的序列称为Pribnow盒(box) ，结合位点;酶与模板的辨认结合;Pribnow框盒（Pribnow box）;不同的σ因子识别特定的启动序列;Promoter(启动序列或启动子)：;（二）转录过程;1、转录的起始;转录起始需要RNA聚合酶全酶;;RNA聚合酶含有两个结合NTP的部位 起始部位：优先结合嘌呤核苷酸ATP/GTP 延伸部位：;(2)真核生物的转录起始 顺式作用元件(cis-acting element) -35区　 5 ′-TATA Hogness盒 TATA盒 -40～-110区　CAAT盒　　GC盒 反式作用因子(trans-acting factor) 转录因子（ＴＦ） 转录因子和真核生物的转录起始复合物 ＴＦⅡ Ａ、Ｂ、Ｄ、Ｅ、Ｆ　 起始前复合物（ＰＩＣ）; PIC ;2、转录的延伸;转录空泡(transcription bubble)：转录过程中，RNA聚合酶及其所覆盖的DNA双链以及合成的RNA共同构成的复合物，又称为转录复合物。;延伸的方向是5’ →3‘ RNA的5′端伸展在转录空泡之外;5?;;人 45s rRNA 基 因 的 转 录;;3、转录的终止;依赖ρ因子的转录终止（弱终止子）;;DNA模板上靠近终止处，有些特殊的碱基序列，转录出RNA后，RNA产物形成特殊的茎环（stem-loop)或发夹(hairpin)结构来终止转录。;茎环结构使转录终止的机理;DNA链的3′-端附近有回文结构，富含G-C碱基，其后紧密相连A-T碱基 以这段终止信号为模板转录出的RNA形成具有茎环的发夹形结构，其3′-端含一串UUUU……尾巴 发夹结构阻碍了聚合酶进一步延伸，RNA链的合成终止 寡聚U可能提供信号使RNA聚合酶脱离模板 ;茎环(stem-loop)结构终止转录;抗终止因子;转录的过程;3、转录的终止;RNA聚合酶催化的转录过程;二、转录后加工;;（一） 真核生物mRNA的转录后加工 2、真核生物mRNA前体的剪接 ①hnRNA和snRNA hnRNA →mRNA snRNA U族 300个核苷酸组成 与核内蛋白质组成snRNP 与内含子的剪切有关 ②断裂基因(split gene) 外显子(exon) 内含子(intron);③mRNA 的剪接 套索剪切模式;;（二） 真核生物tRNA的转录后加工 切除部分序列: 5′-端 一段前导序列 　 反密码子环 一段插入序列 3′-端CCA-OH的生成 tRNA核苷酸基转移酶 某些碱基的化学修饰: 甲基化 还原反应 DHU 脱氨反应 ;（三） 真核生物rRNA转录后加工;三、相关概念;三、相关概念;三、相关概念;四、转录过程的调节控制;转录起始的负调控;一. 乳糖操纵子;(一)乳糖操纵子的结构与功能;; 启动子（promoter）的结构与功能 （Prok.E.coli） 启动子由两个部分组成 （1） 上游部分 — CAP-cAMP结合位点（正控制位点）