利用酶联免疫反应鉴定梨树S基因型.pdfVIP

江苏农业学报(JiangsuJ.of Agr.Sci. ),2015,31(5):1124 ~1128 1124 http:/ / 王春雷,高季平,赵宪坤. 利用酶联免疫反应鉴定梨树S基因型[J].江苏农业学报,2015,31(5):1124-1128. doi:10.3969/ j.issn.1000-4440.2015.05.028 利用酶联免疫反应鉴定梨树 S基因型 王春雷, 高季平, 赵宪坤 (扬州大学园艺与植物保护学院,江苏 扬州 225009) 摘要: 梨是蔷薇科植物,具有典型的配子体自交不亲和性。 获取各品种S基因型是果树生产中一项重要内容。 现有S基因型鉴定方法存在一些缺陷。 利用通用引物扩增S-RNase高变区,结合单链核苷酸探针杂交、酶联免疫反 应,成功鉴定8个品种的7个S基因型。 PCR酶联免疫法结果显示爱宕(S S ),爱甘水(S S ),二十世纪(S S ),丰水 2 5 4 5 2 4 (S S ),今村秋(S S ),新高(S S )和幸水(S S )7个品种都能与各自对应的S基因型探针杂交结合,颜色反应明显, 3 5 1 6 3 9 4 5 无明显假阳性反应。 秋荣(S S )S -RNase基因在花柱中不表达,只在秋荣花柱中检测到S -RNase基因信号。 与目 4sm 5 4sm 5 前已有的方法相比,PCR酶联免疫法操作简单,结果可靠,能够广泛用于梨树S基因型鉴定。 关键词: 梨; 自交不亲和性; S基因型鉴定; 酶联免疫反应 中图分类号: S661.2 文献标识码: A 文章编号: 1000-4440(2015)05-1124-05 S genotyping in pear by PCR-ELISA 1 WANG Chun-lei , GAOJi-ping, ZHAO Xian-kun (School of Horticulture and Plant Protection,Yangzhou University,Yangzhou225009,China) Abstract: Pear,belonging to the family Rosaceae,possesses gametophytic self-incompatibility. Since SI inhibits self-fertilization,it is essential to obtain information on S genotypes of cultivars for successful planting. A method using a semi-automated sequencer is not convenient. S genotyping by dot-blot analysis requires considerable time and skill,and it is not suitablefor identifying S genotypesof a small number of cultivars. Arapid andreliablenew methodfor Sgenotyping is needed to be developed. To solvethoseproblems,inthis study,aPCR-ELISAusing a set consensusprimersto amplify the fragmentcoveringhyperva