桦褐孔菌深层培养条件及生物富集硒、锌、锗探究.pdfVIP

深 层 发 酵 diblefungi 2012 （3 ） 桦褐孔菌深层培养条件及生物富集硒、锌、锗研究 蔡建秀 吴政声 庄亮亮 （泉州师范学院化学与生命科学学院，福建泉州362000） 摘 要 研究桦褐孔菌深层发酵培养的最适培养条件，以及在最 1 材料与方法 适培养条件下富集硒、锌、锗对其的影响，三种重金属均设计了6 个浓度梯度：30 mg/L、40 mg/L、80 mg/L 、120mg/L、160mg/L、 1.1 供试材料 ①桦褐孔菌菌种（购自河北省科学院微生 200mg/L。培养方法采用了液体和固体两种。结果得出了桦褐 物研究所）；②化学试剂：葡萄糖，甘露醇注射液，蔗糖，可溶 孔菌深层发酵培养的最适培养条件以及在此条件下硒、锌、锗的 性定粉，D-果糖，麦芽糖，马铃薯，磷酸二氢钾，七水合硫酸 最适富集浓度。最适碳源为果糖，硒、锗、锌最适富集浓度分别为 镁，琼脂，蛋白胨，水，七水合硫酸锌，亚硒酸钠，氧化锗。 40mg/L、30mg/L 、40mg/L。 1.2 试验方法[2]，[6]-[10] 关键词 桦褐孔菌 深层发酵 富集 硒、锌、锗 1.2.1 培养基 ①母种培养基采用综合PDA培养基：去皮 文章编号 1000-8357（2012）03-0014-03 马铃薯20%（煮沸30min后去渣），葡萄糖2%。②基础培养 桦褐孔菌[1nonotusobliquus（Fr.）Pilat]属于真菌门、担子 基：葡萄糖20.0g/L，蛋白胨3.5g/L，KHPO 1.5g/L，MgSO ·7HO 2 4 4 2 菌亚门、多孔菌科（Polyporaccae）、褐卧孔菌属（Inonotus）的植 1.0g/L，pH6.0。③试验培养基：将基础培养基中的葡萄糖分别 物，主要布于北纬45°~50°的地区，在我国主要分布于黑龙江 以蔗糖，果糖，麦芽糖，乳糖，可溶性淀粉，甘露醇取代进行碳 省和吉林省。十六世纪至今，桦褐孔菌一直作为民间药物， 源试验。④摇瓶发酵：三角摇瓶装液量150mL/300 mL，灭 在预防和治疗癌症、心脏病、肝病、糖尿病、胃病和食道等方 菌，冷却，用打孔器打下大小均匀一致的菌种并接入，静置 面起到独到效用，且无任何毒副作用。由于桦褐孔菌自然产 一天，然后置于 135r/min 的恒温培养振荡器上振荡培养 量较少以及人工子实体栽培的不易，其野生子实体的价格十 168h。 分昂贵，因此采用液态深层发酵培养桦褐孔菌菌丝体是目前 1.2.2 菌种活化培养 保存菌种接种在PDA试管综合培养 经济、环保的方法。桦褐孔菌菌核提取物对胃癌细胞有抗增 基上，在28℃恒温培养箱中培养7~9d，活化后备用。 殖作用和诱导凋亡作用，有效抑制传染性病毒，抗衰老，清除 1.2.3 不同碳源对桦褐孔菌菌丝生长的影响[9]-[14]，[17] 体内的自由基的作用。 固体培养 配制PDA培养基、基础培养基、试验培 硒、锌是人体必需的微量元素，硒通过谷胱甘肽过氧化 养基共七种固体培养基，灭菌后倒入培养皿，冷却，用打孔器 物酶、辅酶Q和维生素E维持自由基的正常代谢以维持人体 将大小均匀一致的菌种接入。每种碳源接种5个培养皿。观 正常生理机