天麻共生蜜环菌菌包及替代菌材原料的筛选优化.pdfVIP

培 养 材 料 2012 （4 ） diblefungi 天麻共生蜜环菌菌包及替代菌材原料的筛选优化 1 1 1 1 2 1* 刘 冰 王后平 李海东 张汉波 曹安江 杨明挚 （1云南大学生命科学学院，云南昆明650091；2云南省昭通市天麻研究所，云南昭通657000） 摘 要 选用壳斗科及桦木科常见树种的细小枝条和叶片及农 普通型及加富型PDA培养基配方（固体及液体型）参考文献 作物茎干培养蜜环菌，分析测定菌丝体的长势和性状并对材料进 [1]、文献[2]等。自昭通彝良小草坝采集的腐烂木材韧皮部中 行评价。筛选出玉米秸秆可作为蜜环菌菌包生产的最佳原料，而 分离得到的蜜环菌菌株，利用ITS序列进行分子鉴定后，保存 麻栎枝段可作为天麻种植中替代菌材的最适材料。玉米秸秆添 于普通PDA培养基上备用。 加2%蔗糖可显著增加菌丝产量和缩短培养周期。与麻栎枝段相 1.2 试验方法 比，质量比为7：3的麻栎和旱冬瓜混合枝段培养蜜环菌，菌索产量 1.2.1 母种培养 切取约0.5cm 大小的供试菌株菌块接种3 和性状无显著差异，但菌丝生长更好。 于装有20 mL加富型固体PDA 试管（18mm×180mm）中。 关键词 蜜环菌培养 天麻栽培 替代材料 25℃恒温暗箱培养30d，培养基内长满白色粗壮菌索后待用。 文章编号 1000-8357（2012）04-0023-03 1.2.2 液体原种制备 截取高度4 cm上述含菌索母种，尽 蜜环菌（Armillariamellea）是名贵药用植物天麻（Gastro⁃ 量剔除附着的半固体培养基后充分剪碎。接种于含250mL diaelata）的共生菌。蜜环菌以菌索的形式侵入天麻营养繁 加富型PDA液体培养基的500mL三角瓶中。置于旋转式摇 [1] 殖茎并被同化，是天麻无性繁殖阶段的唯一营养源 。在蜜 床28℃恒温、120r/min摇瓶培养5d至菌液呈浅红色。 环菌伴栽天麻的生产流程中，蜜环菌母种经扩繁后接种于树 1.2.3 菌包原料的筛选及优化 在罐头瓶（60mm×80mm） 叶或细碎枝段，形成菌丝体生长旺盛的菌包，后者转染粗壮 中称取各种供试植物叶片、玉米秸秆、小麦秸秆各5g，每个 椴木发展成长满菌索的菌材。菌材上的菌索健壮程度与多 处理3次重复。清水浸泡24h使材料充分吸水，控制含水量 [2] 寡则直接决定了天麻的质量和产量 。云南南昭通地区由于 为材料干重的200%。121.3℃灭菌1h，冷却至室温。每瓶接 其阴雨湿润的特殊气候以及丰富的森林资源，成为全国闻名 种1.2.2中培养的菌液4mL。室温、黑暗条件下培养，考察不 [3] 的天麻生产基地 。然而，生产实践发现蜜环菌在树叶菌包 同培养料上菌丝体长势及性状。根据上述试验结果，在5g 中菌丝体生长缓慢、产量低、分布不均，存在原料利用率低、 玉米秸秆中分别使用蔗糖溶液（0.5%、1.0%、1.5%）和酵母浸 菌材培养时间长等问题。菌材多采用