13-甲基十四烷酸诱导膀胱癌细胞株T24凋亡与其机理分析.pdfVIP

◇!，烹叁。羹 13一甲基十田虎酸诱导膀胱癌细胞株T24碉亡覆其机理研竞 白进行SDS．PAGE电泳，然后用可能参与细胞凋亡的各种蛋白的抗体 进行蛋白免疫印迹分析，ECL化学发光，曝光后进行图像分析。 结果 1．MTT法检测不同药物浓度的13．MTD对膀胱癌细胞生长的影响 与对照组相比，13一MTD对膀胱癌T24细胞株增殖抑制作用明显，其中 (P0．05)。相对抑制率(IR)表明13一MTD的抑制作用有时间浓度依赖效应。 2．流式细胞仪检测细胞周期和凋亡率 13．MTD处理细胞2、8、24、48小时后，随着药物作用时间的增加，亚二 倍体峰细胞数量显著增]JH(P0．05)，48小时后细胞的凋亡率可以达到84％，但不 同时间的细胞GO．G1，s期，G2／M期的DNA百分比没有明显的差别。 3．TUNEL法检测细胞凋亡指数 TUNEL法检测结果经定量分析证实细胞凋亡率差异有统计学意义(n=10， P=0，叭)，采用LSD一，法进行药物组和溶剂组组问比较结果显示：药物处理12小 24小时差异更加明显[(68．2±3．8)％，(6_3±0．35)％，P0．01]。 4．western 路 药物处理后细胞内bc]一2蛋白量降低，bax含量升高，线粒体中细胞色素C B、RB在12小时出现明显的裂解片段，2 释放，caspase酶底物PARP、Lamin 明显变化，c—myc、P21没有变化。 II 3一甲基十四惋醯诱导膀脱癌细胞诛T24硼亡a其机理研究 结论 1．1 3-MTD可以诱导膀胱癌细胞株T24细胞凋亡，并且具有时间依 赖性和浓度依赖性。 2．1 激活线粒体凋亡途径，使线粒体内的细胞色素C释放到胞浆，激 B、Rb、PARP，促进 活Caspase酶，裂解相应的凋亡底物Lamin T24细胞凋亡。 8MAPK 3．在13一MTD诱导膀胱癌细胞株T24细胞凋亡的过程中P3 抑制。 关键词： 膀胱癌， 13一甲基十四烷酸， 凋亡， Bcl一2，Bax．细胞色素C，FADD， P3 8MAPK信号通路，JNK／SAPK信号通路 P13K／AKT信号通路， ◇毫、．盘。叁，纂 l3一甲基十四惋醯诱导膀胱藏细胃邑株T24硼亡反其机理研究 1 Acidin ofMechanismof3-Methyltetradecanoic Study T24Cells invitro BladderCancer Apoptosis Inducing Departmentofurology． Thesecond university affiliatedhospital,sunyat-sen Masterl candidate：xin—bao degree yin Supervisor：prof．Huangjian ABSTRACT of tumor．Itcausesfirst ofthe Bladdercancerisacommonmalignant