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烟台大学学位论文原创性声明和使用授权说明
原创性声明
本人郑重声明:所呈交的学位论文,是本人在导师的指导下,独立进行研究工 作所取得的成果。除文中已经注明引用的内容外,本论文不含任何其他个人或集体 已经发表或撰写过的作品或成果。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体,均已 在文中以明确方式标明。本声明的法律结果由本人承担。
论文作者签名: 日期: 年 月 日
学位论文使用授权说明
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(保密论文在解密后遵守此规定)
论文作者签名: 导师签名: 日期: 年 月 日
摘要
索拉非尼是第一个被批准上市的多激酶抑制剂类抗肿瘤药物,可有效抑制血管 内皮生长因子受体(VEGFR)、血小板衍生生长因子受体(PDGFR)等多种受体酪 氨酸激酶,同时抑制 RAF/MEK/ERK 等细胞信号途径。这说明其不仅能够通过抑制 肿瘤细胞的增殖来直接治疗肿瘤,还能够通过抑制新生血管的生成来间接地抑制肿 瘤。对于索拉非尼的改造一直以来都是一个抗肿瘤领域的热点。
喹唑啉作为构成小分子激酶抑制剂的重要砌块,多个含有喹唑啉结构的抗肿瘤 药物获批上市,这些药物的作用靶点主要是 VEGFR、EGFR、PDGFR 等与新生血管 生成密切相关的生物靶点。
为了探索活性更好的药物分子,得到新的抗肿瘤药物。本研究在课题组以前研 究成果的基础上,以索拉非尼为先导化合物,通过生物电子等排和骨架跃迁原理, 同时导入喹唑啉砌块,设计并合成了 24 个含有硫脲结构(A 系列),16 个含有脲结 构(B 系列)的索拉非尼类似物。所得药物分子结构均未见公开报道,目标化合物 均采用 1H-NMR, HRMS 表征手段进行了结构确证。
目标产物均通过 MTT 法测试了其对 HCT-15 细胞株、HCT-116 细胞株、SW-480 细胞株、MCF-7 细胞株及 BGC-823 细胞株的体外抗增殖活性,结果显示:绝大多数 化合物对所测试肿瘤细胞具有一定的体外抗增殖活性。其中,化合物 A05,A08, A16,A18,B01,B09 的抗增殖活与阳性对照药物索拉非尼相当,且对于不同肿瘤 细胞的抑制作用具有明显的选择性。末端苯环上的取代基对药物的体外抗增殖活性 影响较大,末端苯环上的取代基为给电子基团(如甲基)时,化合物的抗增殖活性 下降;当末端苯环被两个吸电子基团(如三氟甲基、氟、氯、溴等)取代时,其抗 增殖活性则增强。另外,含芳基硫醚化合物的抗增殖活性较结构相似的芳基醚类化 合物的抗增殖活性略强;脲类化合物的抗增殖活性较硫脲类化合物的抗增殖活性略 强。
在体外评价的基础上,我们选取活性较好的化合物 A08,A16,A18,B01,B09
进行体内抗肿瘤活性测试。我们在健康 C57BL/6 小鼠体内建立黑色素瘤 B16 移植模
I
型,分别给予 A08,A16,A18,B01,B09,索拉非尼及溶剂空白进行治疗。结果表
明,化合物 A08,A18,B01,B09 均有良好的体内抑制肿瘤增长的活性,其对肿瘤 的抑制率分别是索拉非尼的 3~7 倍;而化合物 A16 却没有明显的体内抑瘤活性。
本文采用蛋白免疫印迹法(western blot)测试了 A18 和 B09 两种化合物对 RAF/MEK/ERK 细胞信号通路中关键蛋白激酶的抑制作用。结果表明,化合物 A18 能够有效降低 c-RAF 和 MEK 的磷酸化水平,化合物 B09 能够有效降低 c-RAF,MEK 与 ERK 的磷酸化水平,通过抑制 RAF/MEK/ERK 细胞信号转到通路,从而抑制肿瘤 细胞的增殖。
综上所述,我们设计、合成了两个系列的含有喹唑啉结构的索拉非尼类似物, 并对其体外、体内的抗肿瘤活性及初步作用机制评价,通过生物活性初步评价,化 合物 A08,A18,B01 与 B09 具有较好的体外、体内活性,值得进行进一步的研究与 开发。
关键词:索拉非尼类似物;喹唑啉;化学合成;信号传导通路;抗肿瘤活性
II
Abstract
Sorafenib is the first multi-kinase inhibitor lanch into market which can efficiently inhibit the vascular endothelial growth factor receptor (VEGFR), epidermal Growth Factor Receptor (EGFR) and the RAF/M
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