人PD-L1基因启动子克隆及其荧光素酶报告基因-皖南医学院学报.PDF

5·24 · 皖南医学院学报(J of Wannan Medical College)2016 ;35 (6) · · :1002－0217 (2016)06－0524－03 基础医学 文章编号 人PD-L1 基因启动子克隆及其荧光素酶报告基因载体的构建 1 2 3 2 4 4 1 5 丰 ， ， ， ， ， ， ， 杨 朱 曹 郑 周 王 潞 吴 江舟 梦梦 彬彬 文清 立春 兴路 志浩 (1． ， 241001 ;2． ， 241002 ; 皖南医学院第一附属医院弋矶山医院 肿瘤内科 安徽 芜湖 皖南医学院 麻醉学院 安徽 芜湖 3． ， 241002 ;4． ， 241002 ;5． 皖南医学院 法医学院 安徽 芜湖 皖南医学院 医学影像与检验学院 安徽 芜湖 皖南医学院 ， 241002) 医学生物学教研室 安徽 芜湖 【 】 : PD-L1 PCＲ ， PD-L1 。 : PCＲ PD-L1 摘 要 目的 对人源 基因启动子进行 扩增 构建 荧光素酶报告基因 方法 用 扩增方法获得 ;PD-L1 Kpn 、Xho 、 ， PCＲ 。 A549 基因启动子 启动子和载体行 Ⅰ Ⅰ酶切 连接和转化 然后行菌落 以及测序等 构建成功后转染至 PD-L1 。 : PCＲ PD-L1 ， 细胞中并检测 启动子活性 结果 经 方法扩增出 基因启动子片段 ; PCＲ 菌落 鉴定各重组体构建正确并经 ; A549 。 : PD-L1 生工测序成功 瞬时转染 细胞后经报告基因检测得知所克隆的不同片段序列具有启动子活性 结论 成功克隆 基 ， ， 。 因启动子 构建出不同片段基因启动子荧光素酶报告基因 为进一步研究其分子机制提供详实基础 【 】PD-L1 ;