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匀耐
浙江大学硕士学位论文
浙江大学硕士学位论文
定位……………川……………………………… ..26
杂交分析…………………….…… ..26
2工6 水稻遗传转化……..……………………… 28
2.2.6.1 农杆菌 EHAI05 感受态细胞制备…………………… 28
2.2.6.2 表达载体转化到农轩菌 EHAI05 ………………… 28
…·………………………………………………川 28
酶的准备…川…..……………………… ..29
2.2.6.5 农杆菌介导的水稻转化… ..29
2.2.7 槌株再生与初步鉴定…………………川………………… .30
2.2.8 半定量 RT-PCR 分析…………… ..30
2.2.9 株高、叶形及石蜡切片观察 30
2.2.9.l材料固定……………………… 30
2.2.9.2材料脱水、透明、浸蜡与包埋川……..……… 30
2.2旦3 切片It……… 31
2.2.9.4 染色观察………………………………………………… ..31
2工 10 产量性状观察… 31
2.2.11 花粉活性观察 31
3.结果与分析,.………..…………………………叫…… 32
3.10siICK4 基因的特征表述…………·……………………………………… 32
3.1.1 OsilCK4 基因的分离…………………… 32
3.1.20siICK4 基囚的核背酸序列及氨基酸序列分析…… 32
3.1.3 亚细胞定位.,………川..………………… 34
3.1.4 OsiICK4 均 CDKs、cyclins 的互作分析…… 34
3.20silCK4 基因过量表达对水稻植株形态及种子发育的影响 35
3.2.1 推定的转基因植株的获得…,……… 35
3.2.2 转基因植株的鉴定及半定最民下 PCR 分析… 35
3.2.3 OsilCK4 基因过量表达影响植株茎的生长 1. 36
3工40silCK4 基因过最表达导致植株叶片反卷…川…,…… 38
3.2.50silCK4 基因过量表达对水稻产量的影响…·……………………… ..40
3.2.60silCK4 基因过量表达影响花粉的完整性和活性… 41
4.讨论43
参考文献48
作者简历……,,……………… 54
附;隶主要培养基及试剂配方……………………… 55
致谢
三年的硕士生活即将结束,值此论文完成之际,我怀着深切的感激之惰,谨 向我的导师徐巨民教授致以最诚挚的敬意!
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