冠心病气虚血瘀证小鼠模型Notch信号通路的变化及参参康心胶囊的干预作用研究-中医学、方剂学专业论文.docxVIP

冠心病气虚血瘀证小鼠模型 冠心病气虚血瘀证小鼠模型 Notch 信号通路的变化及参参康心胶囊的干预作用研究 万方数据 万方数据 目 录 中 文 摘 要 1 ABSTRACT 3 缩 略 词 5 前 言 6 一 立题依据 7 1 中医学对冠心病的认识 7 1.1 中医学对于冠心病病名及发病机制的认识 7 1.2 中医对冠心病的辨证分型研究 8 1.3 冠心病的中医药治疗 8 2 现代医学对于冠心病的认识 10 2.1 冠心病的概念及流行病学 10 2.2 冠心病的发病机制 11 2.3 冠心病的诊断检测 11 2.4 冠心病的治疗 12 HYPERLINK \l _TOC_250000 3 Notch 信号通路的相关研究 13 3.1 Notch 信号通路的概念及组成 13 3.2 Notch 信号通路在疾病中的作用 14 4 本研究目的、内容、意义及拟解决的关键问题 15 二 实验研究 17 1 实验材料 17 1.1 实验动物 17 1.2 中药的制备 17 1.3 药品与试剂 17 1.4 实验仪器 17 2 实验方法 19 2.1 技术路线图 19 2.2 动物分组及给药 20 2.3 冠心病气虚血瘀证模型复制 20 2.4 总 RNA 的提取 21 2.5 PCR 扩增 23 2.6 琼脂糖电泳实验 24 2.7 电泳图像分析 25 2.8 统计分析 26 3 实验结果 27 3.1 模型复制 27 3.2 Notch 信号通路相关基因检测 29 3.3 Notch 信号通路相关基因电泳图像分析 31 三 分析与讨论 41 1 冠心病气虚血瘀证动物模型的复制与评价 41 2 参参康心胶囊组方原理分析 42 3 Notch 信号通路与冠心病气虚血瘀证相关性分析 43 4 参参康心胶囊对冠心病气虚血瘀证 Notch 信号通路的干预作用 44 四 结 语 45 五 问题与展望 46 1 问题 46 2 展望 47 参考文献 48 致 谢 53 附 录 57 冠心病气虚血瘀证 冠心病气虚血瘀证 Notch 信号传导通路的变化及益气活血法的干预作用研究 中 文 摘 要 冠心病属于全球性的人类健康问题，发病率、致死率高。近年来国内冠心病发病率 也呈逐年增加趋势，已成为严重危害我国人民健康的问题。现代医学在冠心病诊断治疗 领域取得较大进展，但是冠心病的发病机制的认识依然不完全清楚，尚无早期诊断和疾 病不同阶段的特异性标志物。在治疗方面也存在一定的局限性与问题。中医药治疗冠心 病由于具有个体化治疗特点，在缓解症状、改善生存质量等方面具备一定优势。冠心病 的中医辨证证型中，气虚血瘀证是最为常见的证型之一。Notch 信号通路在心脏及血管 的发育和分化中起着重要作用，同时与心血管疾病的发生发展密切相关：在调控缺血缺 氧损伤的反应、血管发生、心肌修复再生、抑制心肌细胞纤维化等过程中 Notch 信号通 路都有重要作用，已成为现阶段冠心病领域研究的一个热点。目前国内有关冠心病及冠 心病气虚血瘀证与 Notch 信号通路的相关性研究鲜有报道，因此开展冠心病气虚血瘀证 与 Notch 信号通路的相关性研究具有一定的实际意义与理论意义。 目的：研究冠心病气虚血瘀证模型小鼠心肌组织中 Notch 信号通路相关基因 Notch1-4、Hes1、Hes5、Hey1、Hey2、Jagged1 的表达，以揭示 Notch 信号通路与冠心 病气虚血瘀证存在的相关性；同时根据“方证相应”理论，观察益气活血方剂——参参 康心胶囊对 Notch 信号通路干预调节作用，进一步阐明冠心病气虚血瘀证 Notch 信号通 路的变化。 方法：选取 SPF 级昆明小鼠 90 只，随机分为 6 组，每组 15 只。除空白组外，其余 各组采用饥饿、高脂饮食等复合因素诱导气虚血瘀模型。中药各组按组别给予高、中、 低剂量的参参康心胶囊灌胃；阳性对照组给予地奥心血康灌胃；空白组、模型组给予等 体积生理盐水灌胃。28 天证型造模结束后，除空白组外，各组小鼠给予注射垂体后叶素 诱导心肌缺血模型，检测心电图、计算气虚血瘀量表以验证冠心病气虚血瘀证模型是否 复制成功。反转录聚合酶链式反应（RT-PCR）、琼脂糖电泳法检测各组小鼠心肌组织中 Notch1-4、Hes1、Hes5、Hey1、Hey2、Jagged1 的表达，并对结果进行半定量分析，IBM Spss Statistics 19 软件对数据进行统计分析。比较模型组与空白对照组之间 Notch 信号通路相关基因表达的差异，以及参参康心胶囊各组对冠心病气虚血瘀证小鼠 Notch 信号通路的干预作用。 结果：与空白组相比，模型组小鼠心肌组织中 Notc