谷氨酰胺这转氨酶.pptVIP

谷氨酰胺转氨酶;目录;第一、介绍;第二、分离与纯化;1.2 谷氨酰胺转氨酶活测定方法;1.3 提取; 分别测定香菇、平菇、金针菇、杏鲍菇的谷氨酰胺转氨酶粗提液的谷氨酰胺转氨酶酶活性，结果分别为0.261、0.116、0.115、0.276 U/mL。可见不同菌种的谷氨酰胺转氨酶酶活性有较大的差异，香菇和杏鲍菇的谷氨酰胺转氨酶酶活性较强，平菇、金针菇的谷氨酰胺转氨酶的酶活性较弱，从它们的比活性来看，杏鲍菇最高，但市场上杏鲍菇的价格远远比香菇贵，且香菇容易获得，所以选用香菇作为以后的试验材料。;超滤方法 采用WB-3 型的中空纤维膜， 截留分子量为30 000 u，在加冰冷却的条件下，保持泵出水压为0.4MPa，对粗酶滤液进行超滤循环，直到达到相应的浓缩倍数，收集浓缩液。;乙醇沉淀 取粗提取液100 mL，按V（提取液）∶V（乙醇）=1∶1；V（提取液）∶V （乙醇）=1∶1.5；V（提取液）∶V（乙醇）=1∶2体积分数比分别加入经预冷至0 ℃的95 ％乙醇，迅速搅拌，将混和液离心（3 ℃，10 000 r/min，10 min），所得沉淀用0.2 mol/L Tris-HCl 缓冲液（pH6.0）溶解，再次以相同的条件离心，取上清液定容于100 mL，测定酶活，计算酶活收率。 （酶活收率分别为40 ％、38．7