海洋高温噬菌体非特异性核酸酶及溶原相关蛋白的性质研究-海洋分子生物学专业论文.docxVIP

～．／够国家海洋局第三海洋研究所 ～．／够 国家海洋局第三海洋研究所 学位论文版权使用授权书 本学位论文作者完全了解国家海洋局第三海洋研究所 留、使用学位论文的规定，同意本所保留并向国家有关部门或机构送 交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅。本人授权国家海 洋局第三海洋研究所可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关 数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编 本学位论文。 本学位论文属于： 保密口，在 年解密后适用本授权书。 不保密囤。 (请在以上方框内打“／”) 论文作者签名：弋鲨L日期：指导老师签名：二习掌i型幺L日期：加暑年r7知2年7 月 肜日 月／。日 ) ) 目 目 录 目录 中文摘要 一1- 英文摘要 -3- 1前言 ．．．5— 1．1 j陔酸酶 ．．． ． ． ． ．． ．．． ．．． ．．·5一 1．1．1非特异性核酸酶 ．-5一 1．2噬菌体溶原性建立的遗传控制． ．8- I．2．1九噬菌体的溶原与裂解循环 -8· 1．2．2九噬菌体的基因组组成 一9· 1．2．3九噬菌体基因的转录与调控 -lO· 1．2．4九噬菌体溶原性建立的遗传控制 -l卜 1．2．5 C I蛋白的性质 ·l 4- 1．2．6 C II蛋白的功能 ．-l 5- 1．2．7特异位点重组 ·16· 1．3嗜热细菌噬菌体GBSVI和GVE2的基本特征 ．18． 1．4本论文研究目的及意义 ．．-19· 2材料与方法 ．-．20— 2．1材料 ．20· 2．2基本方i：邑 。 。一 ·30· 3结果与分析 一48— 3．1非特异性核酸酶GBSVl-NSN基因的克隆及其性质的研究 ．48． 3．1．1非特异性核酸酶GBSVl-NSN基因的克隆与序列分析 ．-48· 3．1．2非特异性核酸酶GBSVI．NSN的重组表达和纯化 -50— 3．1．3非特异性核酸酶GBSV!．NSN的功能验证 -5I- 3．I．4非特异性核酸酶GBSVI．NSN的酶学性质 -52- 3．2深海嗜热细菌噬菌体GVE2溶原相关蛋白的性质研究 -57． 3．2．1噬菌体溶原维持蛋白C I的结构分析 ．．-57- 3．2．2 I基因的性质研究 ．．． 一59- i 目 目 录 3．2．3 I基因在嗜热细菌噬菌体GVE2宿主体内的转录表达分析 ．．68． 3．2．4 C I蛋白二聚体结构的体外及体内分析 ．．69． 3．2．5 C I蛋白的肽酶性质 一7 1． 3．2．6嗜热细菌噬菌体GVE2的特异位点重组酶VP462的性质研究 一73． 4讨论 。．78． 4．1 GBSVI．NSN核酸酶的性质研究 -78- 4．2深海嗜热细菌噬菌体GVE2溶原性质研究 ．．79．． 5小结与展望 ．81． 参考文献 ．．．82． 附蜀之 ．97． 致谢 ． 。．98． ㈡1] 1．1 1．1 Nuclease ． ．．． ．． 一5- 1．1．1 Non—specific nuclease ．．一5- 1．2 Establishment of the lysogenic state of bacteriophages ．8． 1．2．1 Lysogenic and lytic processes of九system ·-8- 1．2．2 Gene organization of baaedophage九 ”。9· 1．2．3 Gene transcription and regulmion ofbacteriophage九 ·10- 1．2．4 Gene regulation ofestablishment ofthe lysogenic state of九 ．-1 1· 1．2．5 Characterization of C I regulator ．·1 4· 1．2．6 Function of C II regulator ．-15· 1．2．7 Site．specific recombination