配伍对天麻中活性成分天麻苷元在大鼠体内分布影响探究.docxVIP

配伍对天麻中活性成分天麻昔元在大鼠体内分布影响探究 ［摘要］该文采用高效液相色谱法测定各组织匀浆 中天麻昔元的浓度，研究配伍前后天麻昔元在大鼠体内组织 分布的变化，包括心、肝、脾、肺、肾、脑组织。研究表明 天麻昔元在肾脏、肝脏、心脏、肺脏、脾脏、脑组织中均可 分布，天麻、川苇配伍后，肝、肾中天麻昔元的含量不同程 度的下降，肺、脑中含量上升，说明川苇对天麻活性成分天 麻昔元的体内分布具有一定的影响，川苇能够促进天麻昔元 向肺和脑组织分布。该文为天麻和川苇配伍治疗脑部疾病提 供一定的科学依据。 ［关键词］川苇；天麻；配伍；天麻昔元；组织分布 中药成分复杂，复方给药通常会发生药味成分之间的相 互作用，使药物活性成分在体内的药动学行为发生改变 ［1-2］ o川苛、天麻为治疗头痛的经典药对，具有活血化瘀、 息风止痛的功效。其中，川苇［3］为伞形科多年生草本植物 川苇Ligusticum chuanxiong Hort.的根茎，具有活血化瘀， 行气开郁的功效；天麻［4］为兰科天麻属天麻Gastrodia elata Bl.的干燥块茎，具有平肝抑阳，息风止痉的作用。 文献表明［5-6］,川苇具有“上行头目”的作用，常常与其 他药物配伍治疗头痛。本文研究天麻川苇配伍前后天麻活性 成分体内分布情况，探讨川苇天麻的配伍规律以及川苛引药 上行的作用，从而为治疗脑部系统疾病的新药研究提供新思 路和新方法。 1材料 Agilent 1200 HPLC （包括脱气机，四元泵，柱温箱， VWA检测器）；Agilent LC系统化学工作站（美国Agilent 公司）；KQ-300E超声波清洗器（昆山市超声仪器有限公司）; SIGMA 2K15C台式高速冷冻离心机（德国SIGMA公司）； BT-2000氮气吹干仪（北京八方世纪科技有限公司）。 川苇提取物（南京泽朗医药科技有限公司，批号 100809）；天麻提取物（南京泽朗医药科技有限公司，批号 S；天麻昔元对照品（仪征市鼎信化工有限公司， 质量分数为99. 5%）；乙睛、甲醇为色谱纯；双蒸水（自制）。 SD大鼠体重（200±20） g,雌雄各半，由江西中医学 院实验动物中心提供，合格证号SCXK （赣）2005-0001 o 2方法 2.1生物样品预处理方法［7］取出组织样品剪碎，按质 量的2倍量加生理盐水匀浆，于4 000 r ? min-1, 4 °C离心 15 min,得各组织匀浆液。 取各组织匀浆液1 mL置5 mL离心管中，加入3 mL甲 醇-乙月青（1 : 4）,涡旋震荡2 min,于12 000 r?min-1, 4 °C 离心15 min,取上清液于40 °C水浴N2吹干，残渣用100 uL 流动相复溶，于12 000 r?min-1, 4 °C离心15 min,取上 清液20 uL进样HPLC测定。 2. 2 色谱条件 Luna C18 色谱柱(4.6 mm X250 mm, 5 um)；流动相为乙睛-水(3 : 97)；波长221 nm；柱温30 °C； 流速1 mL?minT；进样量20卩L。 2. 3数据分析 所有实验数据的测定值均以土s表示。实 验数据处理采用药动学参数为DAS 2.0分析选用统计矩参 数，采用GraphPad Prism 5作图表，统计学分析使用SPSS 13. 0进行配对t检验。 2. 4对照品溶液的配制精密称取天麻昔元 (gastrodigenin)对照品25 mg用流动相溶解并定容至25 mL 量瓶中，配制成1 g?L-l的对照品溶液，即为对照品储备 液，于4 ￡保存备用。 2. 5专属性考察 取空白组织匀浆，以及加入适量天麻昔 元和灌胃给药30 min后的心、肝、脾、肺、肾、脑组织匀 浆，按2.1处理后，进样测定。结果表明在本实验的色谱条 件下，方法专属性好，组织中内源性物质不干扰天麻昔元的 检测，天麻昔元峰形较好，见图1 (以大鼠脑组织为例)。 2.6标准曲线的制备精密量取天麻昔元对照品储备液 适量，用流动相稀释制备系列标准溶液，加入到大鼠心、肝、 脾、肺、肾、脑组织匀浆液中，制成含一定量天麻昔元组织 匀浆液样品然后按照生物样品预处理方法处理后进样分析， 记录峰面积。以测得生物样品的峰面积(Y)对浓度(X)进 行回归计算，得各组织匀浆样品中天麻昔元的标准曲线，见 表lo 2. 7精密度考察 取心、肝、脾、肺、肾、脑组织匀浆液, 精密加入天麻昔元对照品溶液适量，配制成含一定量天麻昔 元高、中、低组织匀浆液。然后按2. 1处理样品，同1 d平 行测定6次，连续测定3 d,测得天麻昔元的峰面积，计算 日内、日间精密度。结果高、中、低3个浓度的日内精密度 RSD分别为4. 0%, 8. 6%, 12%及日间精密度RSD分别为5. 9%, 7