驱虫斑鸠菊对B一16黑素瘤细胞酪氨酸酶活性及黑素生成影响.PDF

维普资讯 氨基醣和生物资薄 AIl【il【。Adds＆ BioticResource~2002，24(1)：31～32 驱虫斑鸠菊对 B一16黑素瘤细胞酪氨酸酶活性及黑素生成影响 邓瑞春 ，周 勇 ，章金刚 ，徐建国 ，尚 靖 ，于鲁海 ，王冬平 (1北京中医药大学中西医结合研究所，北京 100029；2新疆 自治区人民医院临床药学研究所； 3军事医学科学院野战输血研究所 ；4军事医学科学院实验动物中心) 捕要：且的：探讨驱虫斑鸠菊体外对酷氨酸酶活性影响，以及对小鼠B一16黑素瘤细胞株细胞增殖、黑素合成以及细胞内 酩氨酸酶 的作用 。方法 ：利用 四甲基偶氨唑蓝(Mlq)比色法测定药物对细胞增殖的影响；采用酶学方法研究药物对酷氨酸酶 活性的影响；470nm 比色法测定黑素台量。结果 驱虫斑鸠菊体外可澈活酷氨酸酶活性，增强B一16鼠黑素瘤细胞增殖．提高 酩氨酸酶和黑色素合成能力；对整体动物黑素细胞具有促进台成和分泌作用。结论 在 白蠹风的治疗中．驱虫斑鸠菊可增强酷 氨酸酶活性，进而促进黑素合成。 关蕾词：驱虫斑鸠菊；酷氨酸酶；白蠹风；鼠黑素瘤细胞 中圈分类号：R2855 文献标识码 ：A 文章编号：1006—837612002)01—0031—04 驱虫斑鸠菊注射液是从新疆特有的菊科植物驱 X一100(SIGMA，uSA)；二 甲基亚砜 (DMSO)。北京 虫斑鸠菊 (Vernoniaanthelmintica)L1_2的种子研制 石鹰华工厂；小鼠黑素瘤细胞：由本室冻存。实验动 而成的浅棕色灭菌水溶液。具有燥湿祛风 ，舒筋通 物：健康、雌性，体重(20±2)g~／lb／c纯系小鼠，购 自 络，活血化瘀作用；临床应用结果显示，其治疗白癜风 军事医学科学院实验动物中心。TGL16g台式高速 具有明显效果 。本室前期工作证 明驱虫斑鸠菊可 明 离心力 (上海 医用分析仪器厂)；X960酶联免疫测定 显抑制小鼠脾脏细胞活性 。已有文献报道其对蘑菇 仪(德国)。co2培养箱 (Heraeus上海分公司)；多用 酪氨酸酶 (mushroom tyrosinase)活性有明显促进作 振荡器(北京冰箱电机厂)。 用。为了深人研究驱虫斑鸠菊治疗 白癜风的作用机 1．2 方法 理，本文以正常小鼠和体外培养的小鼠黑素瘤细胞作 12．1 酪氨酸酶活性测定：参见文献(1～5)，并稍加 模型，探讨驱虫斑鸠菊作用分子机理 ，为其在临床上 修改。分别在 0．5ml离心管中，依次加人下列溶液 广泛应用提供理论依据。 (表 1)，溶液37℃，温育5min，酪氨酸酶加人后立刻 测定 475nm吸光度值。 l 材料和方法 裹 1 溶液加^量 1．1 试剂和材料 溶液 加 ^ 量 驱虫斑鸠菊注射液：每毫升相当于驱虫斑鸠菊黄 驱虫斑鸠菊 0 50 100 150 200 2S0 0．01rⅡ0I／LPB缓冲液 250 200 150 100 50 0 酮3lag(约相 当于原 生药 250mg)；DMEM (Hy． 6reotol／LL—D0PA 200 200 200 200 200 2帅 clone)；DL一多巴：ACROS公司产 品(USA)；酪氨酸 6850u／ml酷氨酸酶 20 20 20 20 20 20 酶 ：6850u／mgBIOCHEMIKA (SwITzER LND)。 1．2．2 试剂配制和实验分组：体外实验共分8个实 睦唑兰 (MTT)AmerahamLifeselene(USA)；曲拉通 验组：驱虫斑鸠菊用含 l0％小牛血清的高糖 DMEM