高产S一腺苷甲硫氨酸酵母菌株的筛选-食品与发酵工业-中国食品.PDF

高产S一腺苷甲硫氨酸酵母菌株的筛选 刘 勇1’2，刘建玲1，王璋2 1(西北大学生命科学学院，陕西西安，710069)2(中国食品发酵工业研究院，北京，100027) 摘 要 从土壤和酒曲中对产孓腺苷甲硫氨酸的酵母菌株进行了筛选，通过HPLC外标法测定得到8株产量 较高的酵母菌株。对高氯酸细胞破壁和酵母细胞水解作用条件进行优化，确定了高氯酸提取孓腺苷甲硫氨酸的 理想条件为2．5mol／L高氯酸10mL，时间为5h，菌体量为0．6g。 关键词 土壤，酒曲，S一腺苷甲硫氨酸，高氯酸，优化 1．1．1 菌种和土样样品来源 S一腺苷甲硫氨酸(S—adenosyl—L—methionine， SAM)u。，所示，1952年Cantoni[2]发现其为甲硫氨酸参照土样采集标准方法[6]。采集了8份土样。采 在生物体内的活性形式。SAM在生物体内由甲硫氨 样时先除去表层5cm表土，取5～15cm深的土壤，装 酸和ATP经SAM合成酶(EC2．5．1．6)合成[3]，是 到灭过菌的大试管当中，每份样品重约20g。同时分 一种重要的生理活性物质，参与了40多种生化反应， 离了本实验室保藏的酒曲和啤酒废液中的酵母。 具有转甲基、转硫基、转氨丙基等作用。肝脏是合成 1．1．2主要化学试剂 和降解SAM的主要场所，肝脏内每天几乎有50％的 甲硫氨酸转化成SAM，并且超过85％的转甲基反应 氨酸等均为分析纯试剂。 发生在肝脏中，SAM代谢异常将会导致各种肝脏疾 1．1．3 培养基 病和精神混乱。临床实验证明，SAM对关节炎，抑郁 斜面培养基：麦芽汁(12。Brix)20mL，葡萄糖20 症、肝功能紊乱等疾病都有较好的疗效。早在1970 g，蛋白胨1g，琼脂粉18g，蒸馏水1000mL， 年代末，SAM就开始出现在欧洲的医药市场上，当时 rain。 pH6．0。121℃湿热灭菌20 是用做治疗关节炎的抗炎止痛药物，据推测其作用机 酵母分离筛选培养基：葡萄糖10g，蛋白胨59， 制可能是由于SAM对花生酸系统的干扰；1990年美 1 5 KH2P04g，MgS04·7H20 g，0．03％ g，琼脂粉18 国FDA也通过了随机双盲法验证后，迅速成为美国 链霉素稀释液100mL，1／3000孟加拉红水溶液100 最畅销的保健品之一，但目前国内使用主要依赖于进 mL，蒸馏水800 min。 mL，pH自然。121℃湿热灭菌20 口，由于价格昂贵限制了其在临床上的应用。 摇瓶发酵培养基：葡萄糖50g，蛋白胨10g，酵母 近年有报道，某些微生物能够在体内积累SAM， 浸粉5g，K2HPO。2g，KH2PO。4 尤其是一些酵母属的菌株，当在培养基中加入一定量