西瓜食酸菌TA基因酵母双杂交诱饵载体的构建及其自激活作用的检测.pdfVIP

新疆农业科学 西瓜食酸菌 基因酵母双杂交诱饵载体的构建 及其自激活作用的检测 胡金凤 黄成文 刘 君 新疆农业大学林学与园艺学院乌鲁木齐 新疆农业大学农学院乌鲁木齐 摘 要 目的构建西瓜食酸菌基因的酵母双杂交诱饵载体为探究 基因编码产物参与西瓜食酸菌致 病的机制奠定基础 方法通过扩增基因并定向克隆到载体 获得可用于酵母双杂交的诱 饵载体 经酶切鉴定和测序验证为正确后将 转化到酵母菌株 中进一步用 报告基因活性检测法检测 的自激活作用 用固体及液体营养缺陷型培养基培 养法检测 的毒性作用 结果 诱饵载体 对酵母菌株 没有自激活及毒性作 用 结论所构建的诱饵载体可用于酵母双杂交系统的后续工作为进一步从被西瓜食酸菌侵染的黄瓜子 叶 文库中筛选与 互作的蛋白奠定了基础 关键词西瓜食酸菌基因酵母双杂交诱饵载体 中图分类号文献标识码文章编号 物烟草 上诱导过敏性坏死 引言 反应的能力也丧失其基因功能注释为编码细菌 研究意义 由西瓜食酸菌 新陈代谢途径中的一个相对保守的酶为该菌的 引起的细菌性果斑病 致病必需因子但目前未见有关于参与任何 以下简称是一种可对葫芦科植物造 病菌致病作用机制的研究报道 酵母双杂交系统 成毁灭性危害的病害 自从 年在美国的 最初是由 和 一些商品西瓜地自然爆发以来 该病害已在 建立的用于检测蛋白与蛋白相互作用的 全球传播蔓延并被发现也可导致甜瓜籽瓜南 一种方法它可以在活体酵母中探究蛋白质间的 瓜笋瓜以及黄瓜等其它葫芦科植物发病 相互作用并用于发现蛋白的新功能及新蛋 细菌性果斑病目前已经成为全球葫芦科作物产业 白 研究欲使用酵母双杂交系统筛选与 的严重威胁 迄今为止世界范围内针对 互作的蛋白对探究西瓜食酸菌的致病机制具有 病菌致病的生物学和分子生物学基础的认知非常 重要意义 前人研究进展 目前利用酵母双杂 有限 研究 病菌与寄主互作的分子机理 是 交系统探究蛋白质之间的相互作用已经发展成为 开发有效控制 新途径新方法的基础 一个成熟的研究手段在众多研究中得到应用 基因是研究小组前期工作中筛选西瓜食酸菌