乳腺癌微环境中脂肪细胞可通过瘦素促进乳腺癌MDA-MB-231细胞的.PDFVIP

中国细胞生物学学报 Chinese Journal of Cell Biology 2016, 38(3): 249–256 DOI: 10.11844/cj cb.2016.03.0380 研究论文 乳腺癌微环境中脂肪细胞可通过瘦素促进乳腺癌 MDA-MB-231细胞的增殖与迁移 * 王 婷 王晋蜀 张志慧 姜亚运 夏 菁 苟理尧 刘梦瑶 张 彦 (重庆医科大学检验医学院临床检验诊断学教育部重点实验室, 重庆400016) 摘要 为研究乳腺癌微环境中前脂肪细胞和成熟脂肪细胞对乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖 和迁移能力的影响, 该研究将前脂肪细胞3T3-L 1诱导为成熟脂肪细胞, 再将前脂肪细胞和成熟脂 肪细胞分别与乳腺癌MDA-MB-231细胞共培养, 通过显微镜成像、油红O染色实验、MTT 实验、 Transwell 实验分别观察肿瘤细胞形态、增殖及迁移能力的改变。Western blot和ELISA检测前脂 肪细胞和成熟脂肪细胞瘦素(leptin)的表达水平。细胞免疫荧光法和Western blot分别检测肿瘤细 胞中瘦素受体(leptin recepter, Ob-R) 、瘦素信号通路关键分子及下游靶因子的表达水平变化。结果 显示, 共培养后, 肿瘤细胞形态变得更加纤长, 增殖能力增加(P0.05), 穿过小室的细胞数明显增多 (P0.05)。在成熟脂肪细胞共培养组的肿瘤细胞中还出现了明显的脂质累积。Western blot和ELISA 检测发现, 前脂肪细胞和成熟脂肪细胞均有瘦素的表达。与空白对照组相比, 两个共培养组中肿瘤 细胞的p-Akt 、p-STAT3、cyclin D 1和MMP9蛋白质水平均明显上调(P0.05), 而p-ERK 1/2仅在前脂 肪细胞共培养组中上调(P0.001), 在成熟脂肪细胞共培养组中没有明显变化。和共培养组相比, 瘦 素中和抗体处理后可以抑制肿瘤细胞中瘦素下游信号通路的激活。该研究表明, 前脂肪细胞和成熟 脂肪细胞均能促进乳腺癌MDA-MB-231细胞的增殖和迁移, 且这一促进作用和瘦素信号通路有关。 关键词 瘦素; 脂肪细胞; 乳腺癌; 细胞增殖; 细胞迁移 Adipocytes in Breast Cancer Microenvironment Can Promote the Proliferation and Migration of Breast Cancer Cells MDA-MB-231 by Leptin Wang Ting, Wang Jinshu, Zhang Zhihui, Jiang Yayun, Xia Jing, Gou Liyao, Liu Mengyao, Zhang Yan* (Key Laboratory of Laboratory Medical Diagnostics of Ministry of Education, School of Laboratory Medicine, Chongqing Medical University, Chongqing 400016, China) Abstract To investigate the effect of pre-adipocytes and adipocytes on the proliferation and migration of breast cancer cells MDA-MB-231, we set up a transwell system. Pre-adipocytes or adipocytes were co-cultured with MDA-MB-231 cells in this system. As for MDA-MB-231 cells in different groups, morphological changes were observed by microscope