龟甲胶、鹿角胶含药血清对豚鼠关节软骨细胞活性的影响-中医骨伤科学专业论文.docxVIP

参考文献 参考文献 1 8 致谢 22 文献综述 23 作者简历 。28 III 万方数据 中文摘要目的： 中文摘要 目的： 比较观察龟鹿二仙胶拆方中龟甲胶、鹿角胶含药血清对豚鼠关节软骨细胞的增殖及 MEKl／2和ERKI／2表达的影响，进一步明确龟甲胶、鹿角胶对骨关节炎的防治作用， 为探讨补肝肾中药促进软骨细胞增殖及防治骨关节炎提供新依据。 方法： 1．将48只Wistar大鼠随机分为4组(龟甲胶组、鹿角胶组、盐酸氨基葡萄糖组和 对照组，分别计为G组、L组、A组和K组)，并分别连续灌胃7天后，采血制备含药 血清。 2．对三月龄豚鼠膝关节关节软骨细胞分离、培养及鉴定，并建立体外培养体系。 3．MTT比色法观察5％含药血清对各组豚鼠F2代软骨细胞增殖的影响。 4．ELISA检测MEKl／2、ERKl／2的表达。 5．荧光定量PCR测定软骨细胞MEKl／2、ERKl／2 mRNA的含量。 结果： 1．II型胶原免疫组化染色和甲苯胺蓝染色均为阳性，提示成功建立豚鼠软骨细胞体 外培养体系。 2．MTT比色法结果：龟甲胶、鹿角胶和盐酸氨基葡萄糖含药血清对软骨细胞均有 促增殖作用，G组L组A组K组，伊0．05)。 3．ELISA法结果：龟甲胶、鹿角胶和盐酸氨基葡萄糖含药血清均能有效促进 MEKl／2、ERKl／2的表达，其促表达效果均为G组L组A组K组，r尸O．05)。 4．荧光定量PCR结果：龟甲胶、鹿角胶和盐酸氨基葡萄糖含药血清均能显著上调 MEKl／2、ERKl／2基因的表达，且G组L组A组K组，(尸O．05)。 结论： 龟甲胶和鹿角胶均可上调豚鼠关节软骨细胞MEKl／2和ERKl／2的表达水平，促进 OA软骨细胞的增殖，且滋肾阴的龟甲胶作用强于补肾阳的鹿角胶。 关键词：骨关节炎，软骨细胞，龟甲胶，鹿角胶，豚鼠，细胞活性，增殖 万方数据 AbstractObjective： Abstract Objective： To clarify the role oftortoise shell glue，antler glue treatment of osteoarthritis by observing the effects of Guilu Erxian glue split in the shell glue，deerhorn glue containing serum guinea pig articular chondrocytes proliferation and the expression ofMEKl／2 and ERKI／2，to provide new basis for nourishing liver and kidney to promote articular chondrocytes proliferation for the prevention and treatment of osteoarthritis． Methods： 1．The 48 Wistar rats were randomly divided into four groups(tortoise-shell glue group， deerhom glue group，glucosamine hydrochloride group and control group，respectively，in terms of Group G，L group，A group and K group)，respectively garage for 7 days，blood samples were prepared containing serum． 2．3-month-old Guinea pigs’articular chondrocytes cultured and identified，and establishing the vitro cukured system． 3．Observing the effect of 5％containing serum for F2 generation chondrocytes proliferation by MTT colorimetric． 4．Observing the expression ofMEKl／2 and ERKI／2 from Guinea pigs’articular chondrocytes by ELISA． 5．Observing the expression ofMEKl／2 and ERKl／2 from Guinea pigs’articular chondrocytes by Quantitative PCR． RespLts： 1．Type II