橘子中还原型抗坏血酸的测定-华北理工大学教务处.doc

PAGE / NUMPAGES 营养与食品卫生学 实习指导 华北煤炭医学院 预防医学系 营养与食品卫生学学科 营养与食品卫生学实习指导 周瑞华 宁鸿珍 唐咏梅 刘辉 编 著 2008-4 目 录 实验一、 蛋白质功效比值的课题设计 ………………………3 实验二、 荧光法测定食物中的核黄素 ……………………… 10 实验三、 食品中还原型抗坏血酸的测定 ………………………13 实验四、 营养调查 ………………………………………………17 实验五、 食品中亚硝酸盐含量测定 ……………………………24 实验六、 鲜奶的卫生质量检验 …………………………………26 实验七、 食用油脂的卫生检验 …………………………………30 实习八、 白酒中甲醇的测定 ……………………………………33 实习九、 营养卫生音像 ………………………………………35 实习十、 食品卫生音像 …………………………………………35 实验一 蛋白质功效比值的课题设计 一、学习内容 (一)目的、意义与应用 本实验的目的在于掌握蛋白质功效比值(PER)的概念及意义，了解动物实验的设计、分组及动物饲料的配制等。 蛋白质功效比值(PER)：是测定蛋白质生物利用率最常用的方法，其定义为在严格规定的条件下，处于生长发育期的幼龄动物每摄入1g待测蛋白所增加的体重克数。 本方法是美国公职分析化学协会(AOAC)推荐的测定食物蛋白质营养效应的官方标准之一，国际上广泛应用。 本方法方便、具体，但由于没有考虑维持生命所需蛋白质的量，动物摄入的蛋白质克数与体重增加之间并不成线性关系。 常以已经标定的酪蛋白(标准参考蛋白)的PER值为2.5，以此校正测得的PER值。本法适用于含氮量高于1.80%的物质。 (二) 实验动物及分组 要求用同一来源、同一品系、年龄相近、刚断奶(出生21～28天)的雄性大鼠。动物在实验室适应3-7天才能投入实验使用。 每一种待测样品设一个实验组，外加一个参考(标准)酪蛋白组(阳性对照组)。大鼠按体重顺序，以随机区组法分组，每组动物不少于10只，每组动物数相同。各组动物平均体重组间差不大于5g，组内个体差不大于10g。 (三) 动物饲料配方 在配制饲料前，应先测定样品中各种营养素的含量(蛋白质、脂肪、水分、纤维素和灰分)，以使各组实验饲料及参考酪蛋白组饲料间各种营养素相等（达到AOAC标准)，其中蛋白质含量控制在9.09%，使之相互之间具有可比性。实验组蛋白质来源为待测样品，而对照组（参考酪蛋白组）的蛋白质则要来自参考酪蛋白。 PER实验用合成饲料。100g基础饲料中各种成分物质用量为: 1．样品量X(g)为9.09×100/样品蛋白质含量(%)； 2. 植物油(棉子油或豆油)(g)为8-X×样品乙醚浸出物%； 3. 混合无机盐(g)为5-X×样品灰分%； 4. 混合维生素1g； 5. 纤维素(g)为1-X×样品粗纤维%； 6. 水分(g)为5-X×样品水分%； 7. 最后加玉米淀粉或蔗糖至100g (1)参考酪蛋白：国外用ANRC(商品名称)酪蛋白，此物已经标化，其PER=2.50。如无ANRC酪蛋白，也可用经过标化的酪蛋白作为参考酪蛋白。 (2)混合盐(美国药典，TTSP)：称取NaCl 139.3g，取其一部分置乳钵中，加入0.79gKI，研磨，过60目筛，放入综色瓶中。将余下的NaCl及下列成分置乳钵中研磨:KH2P04 389.0g；CaCO3 381.4g；MgSO4(无水) 57.3g；FeSO4·7H2O 27.0g；MnS04·H20 4.01g；CuSO4·5H2O 0.447g；ZnSO4·7H2O 0.54g；CoCl2 (3)混合维生素：VitA(干燥稳定)2000IU；VitD(干燥稳定)200IU；VitE(干燥稳定)10IU；VitK0.5mg；胆碱200mg；对氨基苯甲酸10mg；肌醇10mg；烟酸4mg；VitB10.8mg；VitB20.5mg；泛酸钙4mg；VitB60.5mg；叶酸0.2mg；生物素0.04mg；VitB12 0.003mg；加葡萄糖或淀粉至1000mg。 （四）动物饲养 实验室应保持各种环境条件适宜于大鼠的正常生长发育(室温22℃～24℃，相对湿度50%～ 实验期为28天，在此期间，动物单笼饲养，分别喂各组实验饲料。动物自由摄食和饮水。在实验期间尽可能保持实验组动物与参考(标准)酪蛋白组动物的全部环境条件一致。 实验期间应记录: 1．实验开始时每只大鼠的体重(精确至0.1g)； 2．每天各只大鼠的饲料摄取量； 3．定期(最多4日)称量每只大鼠的