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实验五
培养基的配制、灭菌及实验室基本技能
一、实验目的和内容 目的：1、学习和掌握配制培养基的一般方法和步骤。 2、了解消毒和灭菌的原理，并掌握 几种灭菌方法的操作步骤。 内容：1、牛肉膏蛋白胨培养基的配制。 2、高氏1号培养基的配制。 二、基本原理 培养基是人工配制的适合微生物生长繁殖或积累代谢产物的营养基质，用以培养、分离、鉴定、保存各种微生物或积累代谢产物。培养基一般应含有水分、碳源、氮源、能源、无机盐、生长因素等。 消毒与灭菌两者的意义有所不同。消毒一般是指消灭病原菌和有害微生物的营养体而言，灭菌则是指杀灭一切微生物的营养体、芽孢和孢子。在微生物实验中，需要进行纯培养，不能有任何杂菌污染，因此对所用器材、培养基和工作场所都要进行严格的消毒和灭菌。消毒与灭菌的方法有多种。 三、实验材料 1、药品或试剂 牛肉膏，蛋白胨，NaCl，NaOH，HC1，琼脂等； 2、其他材料 试管，三角瓶，烧杯，量筒，玻棒，培养基分装器，天平，牛角匙、pH试纸、棉塞、高压蒸气灭菌锅等。 四、实验设备的介绍 灭菌锅 过滤除菌 湿热与干热 湿热—水蒸汽 干热 —热空气 蒸汽灭菌锅 烘箱 121℃ 20～30min 160～170℃ 2h灭菌 （1）灭菌锅的使用 卧式灭菌锅 注意事项： 排净冷空气； 灭菌终了，缓慢降压； 灭菌结束，趁热取出物品。 高压蒸汽灭菌锅 电烘箱的外观和结构 （2）过滤除菌 控制液体中微生物的群体可以通过将微生物从液体中移走而不是杀死的方法来实现。 （a）注射式微孔滤器 （b）小型过滤装置 （c）层流生物安全柜 常用膜滤器 微孔滤膜阻挡微生物 * * * *
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