实验一 药理学实验基本技能.docVIP

实验一 药理学实验的基本技能 一、实验动物的基本技能和实验技术基础 1.实验动物的标记 大、小鼠和白色家兔的标记常用3～5％黄色苦味酸溶液涂于皮毛上标号。常用的方法： 1号 ---左前腿 2号 ---左腰部 3号 ---左后腿 4号 ---头部 5号 ---正中 6号 ---尾根部 7号 ---右前腿 8号 ---右腰部 9号 ---右后腿 10号 ---不标记 2.实验动物的捉持（大、小鼠） (1)小鼠的捉持 用右手提起鼠尾，放在粗糙物（如鼠笼盖）上面，向后轻拉鼠尾；用左手拇指和食指捏住其两耳颈背部皮肤，将小鼠固定在掌中，使其腹部朝上，然后以无名指和小指夹住鼠尾或小鼠的左后肢。 （2）大鼠的捉持 捉持和固定方法基本同小鼠，无经验者可戴上防护手套，并应动作轻柔。用右手捉住鼠尾，放在鼠笼盖上，向后轻拉鼠尾；左手掌面向鼠背，食指和中指压住鼠的头顶，拇指和无名指分别从鼠的两腋下插入，将鼠的两前肢卡住；或拽紧鼠后颈及后背皮肤即可。 图 1 小白鼠捉持法 3、实验动物的给药方法（大、小鼠） （1）小鼠的给药方法 灌胃（ig）：将小鼠固定后，使颈部拉直，右手持装有灌胃针头的注射器，自口角插入口腔，压其头部，使口腔与食道成一直线，沿上腭壁向鼠口腔的后下方轻轻插入食道。如遇阻力，可将针头抽出再插，以免刺破食管或误入气管。一般给药量为0.1～0.3ml/10g（体重）。 图 2 小白鼠灌胃法实验 图 3 小白鼠腹腔注射法 皮下注射（H或sc）：常在背部皮下。轻轻捏起背部皮肤，将注射针头刺入皮下，稍稍摆动针头，若容易摆动则表明针尖位于皮下。然后注入药液。一般给药量为0.1～0.20ml/10g（体重）。 图 4 小白鼠皮下注射法 腹腔注射（ip）：左手固定动物，右手持注射器，从下腹部外侧，呈45度角刺入腹腔，进针约3～5mm，一般给药量为0.1～0.3ml/10g（体重）。 肌内注射(im)：多注射于后肢股部肌肉，一般每侧不超过0.1ml。 尾静脉注射（iv）：将小鼠置于固定筒内，使尾部露在外面，用70％～75％的乙醇棉球擦尾部，或将鼠尾浸入45～59oC温水中，待尾部左右侧静脉扩张后，左手拉尾，右手进针。一般给药量为0.1～0.2ml/10g （2）大鼠的给药方法 均同小鼠。一般情况下，灌胃剂量为1～2ml/100g，皮下注射、尾静脉注射1ml /只，腹腔注射为1.5ml /只，肌内注射为0.1～0.2ml/只。此外大鼠尚有舌下静脉给药的方法。 图 5 家兔耳部血管分布 图 6 家兔耳静脉注射法 4、实验动物给药量的计算 （1）药物浓度的表示方法 溶液的质量（g） 百分浓度（％）=————————— ×100% 溶液的体积（ml） （2）实验动物给药剂量一般按mg/kg(或g/kg)计算。为了方便，大鼠和豚鼠可按每100g计算，小鼠可按每10g计算。 给药剂量=药物浓度×给药体积 （3）给药容量的计算：从已知药的浓度和已知给药剂量算出相当于每1kg体重应给药的毫升数（ml）。 例：小鼠体重22g，腹腔注射盐酸吗啡10mg/kg,药物浓度为0.1%,应注射多少毫升? 药物浓度：0.1%=0.1g/100ml=100mg/100ml=1mg/ml 给药剂量：10mg/kg=10ml/kg 小鼠体重：22g=0.022kg 10ml/kg×0.022kg=0.22ml 或换算成ml/10g来计算较为方便：10ml/kg=0.1ml/10g。这样再计算其他小鼠的给药量就很方便。 5、实验动物的处死方法 （1）颈椎脱臼法 此法常用于小鼠。用左手拇指、食指或镊子用力压住小鼠的后头部，同时用右手抓住鼠尾用力向后上方牵拉，使之颈椎脱臼，鼠立即死亡。 （2）空气栓塞法 此法常用于家兔的处死。用注射器将空气快速注入静脉，可使动物立即死亡。 （3）击打法 适用于较小的动物，如家兔、大鼠和小鼠等。提起动物的尾部，用力敲击动物头部，或用要木锤打击头部，致使动物死亡。 （4）断头法 此法适用于蛙、蟾蜍、小鼠和大鼠。用剪刀将动物头部剪断，由于脊髓娄离且大量出血，动物很快死亡。 二、实验记录的内容和实验报告的写作 1、 实验记录 实验记录是将实验内容如实地记录下来，长期保存备用。其基本原则是真实、及时、准确、完整，实验过程中应认真做好实验记录。内容一般应包括： （1）时间、天气、温度； （2）实验标本：动物的种类、体重、标记和标号及如何分组等。 （3）实验药物：药