课件：第二十一章非发酵菌及检验.ppt

第二十一章 非发酵菌及检验 主讲：陈晓 2019 - * 非发酵菌（nonfeimenters）是一大群不发酵葡萄糖或仅以氧化形式利用葡萄糖，氧化酶阳性（除不动杆菌属）的革兰阴性无芽孢需氧杆菌。 非发酵菌菌属较多，与医学有关的主要有假单胞菌属、不动杆菌属、产碱杆菌属、莫拉杆菌属、黄杆菌属。 多数为条件致病菌，是引起医院感染的重要菌，对抗生素的耐药率高。 概述 2019 - * 非发酵菌主要生化特性 氧化酶试验：最重要的试验。除不动杆菌属，均为阳性。 培养温度：常规标本先培养于35~37℃，再培养于30℃或室温（18~22℃ ）。 动力：以2中培养物悬滴法、压滴法为准，或鞭毛染色法，半固体穿刺则不明显。 2019 - * 葡萄糖氧化/发酵试验：用H-L培养基（改良的O-F培养基）鉴别发酵菌与非发酵菌。 原理：发酵菌发酵葡萄糖产生大量的酸，而非发酵菌只能以氧化形式利用且产酸很少。H-L、O-F培养基的蛋白质:葡萄糖分别为0.2:1、2:1，非发酵菌在H-L中产生的酸多而不被产碱中和，指示剂显色更明显。 方法与结果 闭管 开管 例如 F 产酸变黄 产酸变黄 肠道杆菌 O 不产酸变黄 产酸变黄 绿脓杆菌 产碱型 不产酸变黄 不产酸变黄 产碱杆菌 2019 - * MAC上的生长情况 一般都生长良好，如假单胞菌属、不 动杆菌属、产碱杆菌属，而莫拉杆菌属等 不生长。 2019 - * 假单胞菌属 假单胞菌属（Pseudomonas）是非发酵菌中的一大属，是假单胞菌科的代表菌属。 本属菌为需氧、有端鞭毛、无芽孢、无荚膜、氧化酶阳性的革兰阴性杆菌。大多数为条件致病菌，是医院感染的主要病原菌，常见的有铜绿假单胞菌、嗜麦芽窄食单胞菌、荧光假单胞菌、恶臭假单胞菌等。 本属菌对理化因素的耐受性较强，对多种抗生素耐药。 2019 - * 铜绿假单胞菌 铜绿假单胞菌（P.aeruginosa）是假单胞菌属的代表菌种，为条件致病菌，是医院感染的主要病原菌。可经多种感染途径、污染导致多种感染，且对多种抗生素天然耐药，因此有很重要的临床意义。 2019 - * 生物学性状 形态与结构 G- 杆菌，细长或 球杆状； 单端有1~3根鞭毛， 无芽孢，无荚膜，有 周身菌毛。 铜绿假单胞菌 2019 - * 生物学性状 培养 专性需氧； 生长温度范围20~42℃，最适35℃，42℃生长，4℃不生长； 42℃生长 4℃生长 鞭毛 明胶液化 铜绿假单胞菌 + - 端单鞭毛 + 荧光假单胞菌 - + 端多鞭毛 + 恶臭假单胞菌 - - 端多鞭毛 - 铜绿假单胞菌 2019 - * 生物学性状 培养 营养要求不高，临床上常用BAP、MAC、SS、EMB分离培养，可形成不同形态的菌落特征： 普通琼脂平板：菌落灰绿色，大小不一，扁平光滑湿润，边缘不齐融合状，可有M型、R型。 BAP：扁平、湿润的大菌落，色素明显呈灰绿或蓝绿色，可见透明溶血环。 选择培养基（MAC、SS）：细小，无光泽半透明，中心棕绿色。 肉汤：表面形成菌膜，有色素。 铜绿假单胞菌 2019 - * 生物学性状 培养 色素 绿脓素：蓝绿色，溶于水、氯仿； 绿色荧光素：只溶于水，需在360nm的紫外光下可见。 铜绿假单胞菌 2019 - * 2019 - * 生物学性状 生化反应 氧化酶试验：+ H-L培养基：O型 枸橼酸盐利用试验：+ 明胶液化试验：+ 硝酸盐还原产气（N2）试验：+ 精氨酸双水解酶：+ 铜绿假单胞菌 2019 - * 生物学性状 抗原构造 菌体抗原（O）：包括外膜蛋白、脂多糖两种成分。 鞭毛抗原（H） 抵抗力 对外界的抵抗力比其他无芽胞菌强；对 多种抗生素不敏感。 铜绿假单胞菌 2019 - * 致病性 致病物质 黏附素，多糖荚膜，内毒素，外毒 素，绿脓素，弹性蛋白酶，磷脂酶C。 所致疾病 医院内继发感染，如烧伤创面感染、 败血症等。 铜绿假单胞菌 2019 - * 2019 - * 微生物学检验 标本采集