课件：布病病原学及血清学咸阳.ppt

布氏菌对物理、化学因子的抵抗力 2019 - * 不同环境中的抵抗能力 2019 - * 从种上来说，羊种毒力最强，猪种和牛种次之，犬种的毒力很弱，几乎不引起人致病。 由于菌种毒力等因素的不同，患病后的临床表现也不完全一样。羊种布鲁氏菌患者中毒症状严重，多有典型的发烧、多汗、乏力、关节肿痛、肝脾及睾丸肿大等急性症状。 布氏菌的毒力 2019 - * 布病发病过程 2019 - * 布氏菌的实验室检验 2019 - * 实验室要求： 布氏菌是高致病性病原微生物，从危害程度来说为第二类病原微生物。布氏菌的分离培养要在生物安全二级以上实验室中进行。 样品采集 培养分离 菌株鉴定 种型鉴定 细菌学检验 3 2.1 2019 - * 2.1.1 布氏菌培养检查材料： 人或动物的全血 动物流产胎儿（胎儿的肝脏、肺、胃内容物） 动物脏器、动物胎盘、关节液、阴道分泌物等 新鲜乳汁 2019 - * 2.1.2 双相血培养瓶 采集对象：对急性期和慢性活动期病人未用药前进行血液采集 。 采样方法： 1.使培养瓶恢复至室温、编号； 2. 去掉培养瓶的保护帽，用酒精或碘消毒瓶塞； 3. 用注射器无菌静脉穿刺采集血液5mL，注入血培养瓶； 4. 再次消毒瓶塞和保护帽，盖好保护帽； 5. 从一侧到一侧倾斜培养瓶数次，混匀血液和肉汤。 2019 - * 双相血培养瓶培养方法 1.将瓶子水平放置用肉汤冲洗琼脂5-10分钟以接种琼脂； 2.37℃直立培养。每隔一天观察一次结果，如未长菌，可通过冲洗再接种一次。30天未出菌，可定为阴性，其血培养瓶经高压灭菌处理；如长菌，4℃冰箱保存。 3.培养后观察肉汤和琼脂：出现下列一种或更多现象者为阳性结果： 琼脂上：出现菌落或产生气体。 肉汤中：出现浑浊、沉淀或溶血。 2019 - * 县镇村组 来源及编号：绥德县1号 姓名：张三 采血时间：2015年7月1日 2019 - * 2019 - * 2019 - * 布氏菌特异的油滴样菌落 2019 - * 布氏琼脂布鲁氏菌菌落 2019 - * 血平皿 布氏菌菌落 2019 - * 布氏菌革兰氏染色 2019 - * 3.1.4 布氏菌菌株鉴定 布氏菌诊断血清凝集试验 H2S产生试验，CO2培养依赖试验 染料抑菌试验(硫堇，碱性复红) 单项特异性血清A、M凝集试验 粗糙型（R）血清凝集试验 噬菌体裂解试验 PCR检测 其他方法检测 生化测定 脂肪酸分析 PFGE等 2019 - * 羊种布氏菌噬菌体裂解 2019 - * PCR检测 AMOS-PCR检测方法 提取DNA——PCR扩增——电泳 2019 - * 血清学检验 2.2 3.2.1 诊断标准 （1）流行病学接触史：密切接触家畜、野生动物、畜产品、 布氏菌培养物等或生活在疫区内的居民 （2）临床症状和体征 （3）实验室检查：病原菌分离、试管凝集试验、 补体结合试验、抗人球蛋白试验 具备（1）、（2）和（3）项中的任何一项检查阳性 即可确定为布病病人 2019 - * 3.2.2 布氏菌的血清学诊断方法 虎红玻片凝集试验 (RBPT) 试管凝集试验 (SAT) 抗球蛋白试验 (Coomb`s试验) 含巯基化物处理血清后的凝集试验（2ME 试验） 补体结合试验 (CFT) 乳环凝集试验 (MRT) 酶联免疫吸附试验 (ELISA) 金标法 荧光偏振方法 （FPA） 2019 - * 凝集试验：细菌、红细胞等颗粒性抗原与相应抗体结合后形成凝集团块，这一类反应称为凝集反应。 2019 - * 虎红玻片凝集实验 原理：利用酸性带色的抗原与被检血清作用时能抑制血清中的IgM类抗体的凝集活性，主要检查血清中的IgG类抗体。评价：简便快速、容易操作，适用于基层大面积检疫，容易出现假阳性，结果仅供参考. 2019 - * 方法：在玻片上加0.03ml被检血清，然后加入虎红平板抗原0.03ml，充分混匀，5min之内观察结果。 结果判定：出现可见的凝集反应就判为阳性；否则就为阴性。 2019 - * 2019 - * 注意事项： 血清静止的温度和时间对实验结果有很大的影响，在一定的时间和温度范围内，放置时间越长，温度越高，假阳性率越低； 患者空腹血清出现假阳性少； 凡是试验中凝集颗粒不规则，大小不匀，片状或絮状，凝集不清澈者，一般为假阳性，否则凝集颗粒规则，大小均匀，凝集清澈者，一般与SAT结果相符，为阳性。 2019 - * 原理：