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新疆农业科学2012，49(1)：155—160
Sciences
XinjiangAgricultural
DOI：CNKI：65—1097／S2244．025
网络出版时间：2012—1—3122：44：30
网络出版地址：http：／／www．enki．net／kcms／detail／65．1097．S2244．025．html
犬细小病毒巢式PCR诊断方法的建立及应用
简子健，马素贞，陈胜男，翟少华，赵森
(新疆农业大学动物医学学院，乌鲁木齐830052)
摘要：【目的】以期建立犬细小病毒巢式PCR诊断方法。【方法】根据基因库已发表的CPVVP2基因序列设
计二对巢式引物，以临床上疑似CPV感染的犬粪样品中提取的总DNA作为模板，用巢式PCR方法扩增出
CPV
VP2基因的目的条带。【结果】扩增出的目的基因与国际标准序列的同源性为99．3％～100％。特异性
试验发现该引物不能启动犬其它常见病毒基因的扩增。敏感性试验表明该引物能检测到10。9的CPV总
RNA量。重复性试验显示该引物具有良好的稳定性。对采集的26份样品进行CPV巢式PCR检测，20份样
品为阳性，阳性率为76．9％。【结论】建立的CPV的RT—PCR检测方法可于临床CPV的快速诊断和小规模
的分子流行病学调查。
关键词：犬细小病毒；巢式PCR；检测；应用
中图分类号：$852．65+5文献标识码：A 文章编号：1001—4330(2012)01—0155—06
and ofNested—PCRMethod
DevelopmentApplication
forDetectionof
CanineParvovirus
Pet in
(CPV)from
DogsXinjiang
JIAN Su—zhen，CHEN Sen
Zi—jian，MA Sheng—nan，ZHAIShao—hua，ZHAO
Animal
(Collegeof Medicine，XinfiangAgricultural 830052，China)
University，Urumqi
and ordertoestablishthenestedPCRfordetectionof
Abstract：【objectiveMethod】In CPV。two
pairs
ofthe were totheVP2 ofCPV inGenBankand
specialprimersdesignedaccording genesequencepublished
the wasfoundinthetotalDNA fromthestool of infected
specifictargetstripe template samplesclinically dogs
with was which
indicatedshared99．3％一100％nucleotidewith
CPV．【Result】Sequenceanalysis
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