临床医学毕业自身免疫性感音神经性聋基因治疗的实验研究.docVIP

自身免疫性感音神经性聋基因治疗的实验研宄 姓 名： 2014年6月25日 自身免疫性感音神经性聋基因治疗的实验研宄 作者：蔡文君，谭长强，李玉瑾，黄和，李霜 【摘要】目的：研究以重组复制缺陷型腺病毒为载体的Fas配体（Fas Ligand, 即FasL）基因和白细胞介素10 （即IL 10）基因治疗实验性自身免疫性感音神 经性聋。方法：采用同种内耳组织抗原加弗氏佐剂免疫豚鼠，造成自身免疫性感 音神经性聋的动物模型28只，按配对设计将其分为4组，通过鼓阶微量注射的 方式，A组注入携带FasL基因的腺病毒（Ad FasL）, B组注入携带IL 10基 因的腺病毒（Ad IL 10）, C组单纯注入腺病毒（携带绿色荧光蛋白，即 Ad GFP）, D组注入等量的磷酸盐缓冲液。基因导入7 d后行听觉脑干诱发电 位（ABR）测试，后取颞骨制作石蜡切片并行HE染色和光镜观察，每组各取两 耳行螺旋韧带和基底膜透射电镜观察。每组各取3只（6耳）行免疫荧光和酶免 疫组织化学试验，以检测基因产物表达和腺病毒转染情况。结果：免疫组织化学 显示携带目的基因的腺病毒可以转染血管纹、螺旋韧带、Corti器、螺旋祌经节、 蜗轴小血管周围及其耳蜗的骨壁等部位的细胞，并产生相砬的蛋白产物（IL 10 和FasL）。ABRlir波阈值的均值对比结果显示，A组和B组明显低于C组和D 组。内耳组织的免疫炎性反应亦明显较