临床医学毕业衰老细胞中调控胰岛素样生长因子结合蛋白3的表达.docVIP

衰老细胞中调控胰岛素样生长因子结合蛋白3的表达 姓 名， 2014年6月25日 作者：任文君，王群义，吕小风，毛泽斌，蒋晓刚 【摘要】 目的：研究在衰老细胞中调控胰岛索样生长因子结合蛋白3 (IGFBP 3)表达增加的影响因素。方法：用Northern blot的方法显示IGFBP 3 基因的表达在年轻和衰老的2BS细胞巾存在差异;PCR扩增出人类IGFBP 3上 游包括5 UTR区的2 kb的序列并用酶切得到4组不同长短的IGFBP 3启动 了?片段；将各片段用Effectene Transfection Reagent试剂盒转染到年轻和衰老细 胞中，测出几组构建基凶片段的启动活性，确定町调控转录活性的区域；通过重 叠寡核苷酸凝胶阻滞实验确定在该活性区域屮的增强子元件。结果：与年轻的 2BS细胞和比，衰老的2BS细胞巾IGFBP 3基因的表达升高；在IGFBP 3启 动子+59 到-58 序列之间存在着蛋白结合位点； 5 ccagcctgccaagcagcgtgccccggttgc 3是 IGFBP 3 的培强了元件。结论：在衰 老的2BS细胞中IGFBP 3基凶上游-37到-8的30 bp序列存在一个新的増强子 元件IEE (IGFBP 3 enhancer element),对IGFBP 3的表达起到调控作用。 【失键同】胰岛素样生长因子结合蛋白3; IEE (IGFBP