生物竞赛-生物化学-33DNA复制-杨荣武《生物化学原理（第二版）（三）》(89张PPT).pptVIP

提纲 DNA复制的一般特征 参与DNA复制的主要酶和蛋白质 DNA复制的详细机制 以大肠杆菌为代表的细菌基因组DNA的 “θ-复制”系统 “滚环复制”系统 D-环复制系统 真核细胞的细胞核DNA复制 古菌的DNA复制 DNA复制的高度忠实性 DNA复制的调节机制 DNA复制的一般特征 以原来的DNA两条链作为模板，四种dNTP为前体，还需要Mg2＋ 作为模板的DNA需要解链 半保留复制 需要引物——主要是RNA，少数是蛋白质 复制的方向始终是5′→3′ 具有固定的起点 多为双向复制，少数为单向复制 半不连续性 具有高度的忠实性和进行性 DNA复制起始区的特征 由多个短的重复序列组成； 能够被多亚基的复制起始区结合蛋白识别； 通常富含AT碱基对，这有利于DNA复制起动时的解链，因为AT碱基对含有的氢键数目低于GC碱基对。 John Cairns的实验 复制开始时，将大肠杆菌放在含低剂量的[3H]-dT的培养基中培养几分钟；随后，将细菌转移到含高剂量的[3H]-dT的培养基中继续培养一段时间；最后，收集细胞，小心地裂解以抽取其中的染色体DNA进行放射自显影。如果是单向复制，自显影图谱上银颗粒的密度应该是一端高、一端低；如果是双向复制，则应该中间是一段低密度的银颗粒，两侧是高密度的银颗粒。低密度银颗粒意味着这一段DNA属于复制起始区，高密度颗粒代表的是后来合成的。 Reiji